矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对血红素催化活性的抑制作用OA

为了探究矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(Cyanidin-3-O-glicoside,C3G)对血红素催化活性的抑制作用条件、类型及机制。利用光谱和色谱分析检测方法,结果表明血红素催化H2O2产生·OH氧化2,2′-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS]、3,3,5,5-四甲基联苯胺(3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine,TMB)、邻苯二胺(O-phenylenediamine,OPDA)三种底物的最适pH值分别为4.5、5.5、4.0,最适催化温度分别为50、40、50℃。动力学分析表明,血红素对ABTS亲和力最高,Km=0.37 mmol·L^(-1);对TMB催化速率最快,V_(max)=1.415×10^(-2) mmol·L^(-1)·min^(-1)。在50℃、pH值4~5条件下,C3G抑制三种底物氧化的IC50分别为0.235、1.537和0.305 mmol·L^(-1)。C3G(50~300μmol·L^(-1))对血红素(20 mmol·L^(-1))催化活性的抑制作用呈浓度依赖性,动力学表现为可逆竞争性抑制,随C3G浓度增加,Km逐渐增大、Vmax基本保持不变,抑制常数Ki为2.549 mmol·L^(-1)。抑制机制探究发现C3G能清除血红素催化H2O2产生的·OH,相同浓度下,C3G的·OH清除能力(IC_(50)=0.622 mmol·L^(-1))强于抗坏血酸(IC_(50)=1.076 mmol·L^(-1)),紫外光谱和液相色谱研究结果显示C3G可与血红素结合产生新物质。综上所述,在一定条件下C3G对血红素催化活性有较强抑制作用,该结果可为富含C3G的食品资源利用及开发用于预防或减轻由血红素引发氧化损伤的抗氧化功能食品提供一定理论基础。