板栗花粉蛋白提取工艺对结构、活性的影响及优化OA

板栗花粉富含高价值蛋白质,却因缺乏高效提取技术而被大量废弃,限制了其在功能性食品和医药领域的应用潜力。本研究首次系统比较超声辅助碱提酸沉法(Ultrasound-assisted alkali dissolution and acid precipitation,UADAP)、微波辅助碱提酸沉法(Microwave-assisted alkali dissolution and acid precipitation,MADAP)及硫酸铵沉淀法(Ammonium sulfate precipitation,ASP)三种工艺对板栗花粉蛋白结构特性及生物活性的影响,并以蛋白质得率为考察指标,通过单因素实验结合响应面分析法优化提取工艺。结果表明,三种方法所得蛋白均为典型蛋白质,分子量主要分布于20~100 kDa,呈现特征性紫外和红外吸收峰。热重分析显示,三种蛋白在约280℃发生热降解,其中MADAP提取的蛋白展现最佳热稳定性。抗氧化活性测试表明,MADAP蛋白在DPPH自由基清除、羟基自由基清除及ABTS+自由基清除率方面具有最高活性,活性顺序为MADAP>UADAP>ASP。在降血糖活性方面,三种板栗花粉蛋白对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶均具备良好抑制活性,其中MADAP对α-葡萄糖苷酶抑制效果最优,UADAP对α-淀粉酶抑制活性最强,ASP对两种消化酶的抑制能力均最弱。通过响应面法优化,MADAP最佳工艺条件为料液比1:25 g/mL、提取时间60 min、温度60℃,蛋白质得率达26.41%。综上,MADAP工艺在保留蛋白结构稳定性的同时,显著提升其抗氧化和降血糖活性,为板栗花粉蛋白的高效开发提供了优选技术路线。