利用蚓激酶制备猪血蛋白来源的ACE抑制肽及其降血压活性OA

为了研究蚓激酶作为蛋白水解酶在活性肽开发中的可行性,研究猪血蛋白ACE抑制肽的降血压活性及其作用机制。该文从蚯蚓中提取纯化,得到了酶活为43125.87 U·mg^(-1)蛋白的蚓激酶,利用其制备猪血蛋白ACE抑制肽。分离纯化后得到ACE抑制活性为91.30%的多肽,记为PBEP-M。通过Ang II诱导HUVEC细胞建立损伤模型,采用CCK-8法测定PBEP-M对HUVEC细胞的毒性,使用试剂盒测定ET-1、NO和ROS细胞因子分泌量,通过Western Blot法检测ACEAng II-AT1-R通路中与血压调控相关的蛋白含量。实验结果表明,PBEP-M质量浓度在62.5~1000μg·mL^(-1)范围内,对细胞有显著的增殖作用。质量浓度500μg·mL^(-1)的PBEP-M处理组可显著增加NO的分泌,相比于Ang II组提升了84.00%;且可显著抑制ET-1和ROS的分泌,相比于Ang II组分别降低了53.66%、36.94%。同时PBEP-M可以显著抑制ACE-Ang IIAT1-R通路中ACE、Renin和AT1-R的表达,相比于Ang II组分别降低了76.76%、83.96%和89.05%,并且PBEP-M可以显著促进eNOS蛋白的表达,相比于Ang II组提升了8.77倍。本研究为蚓激酶作为一种蛋白水解酶应用在活性肽的开发中提供了理论基础,也为畜禽血液深加工提供了新的思路和方向。