叶酸的高灵敏竞争ELISA方法建立及其初步应用OA
为实现叶酸含量的高灵敏快速检测,本研究通过制备叶酸单克隆抗体,并对检测体系进行优化,建立了高灵敏竞争酶联免疫吸附试验(Competitive enzyme-linked immunosorbent assay,cELISA)方法。结果表明,当包被抗原浓度为0.5μg/mL,抗体稀释倍数为16000,二抗稀释倍数为10000,一抗、二抗孵育时间和显色时间分别为15、30、10 min时,建立的cELISA方法半数抑制浓度为1.12 ng/mL,最低检测限为0.028 ng/mL。该方法与维生素B1、B2、烟酸等B族维生素无交叉反应,特异性良好,与叶酸结构类似物二氢叶酸、四氢叶酸、蝶酸的交叉反应率分别为12.21%、2.07%和2.72%,检测牛奶和能量饮料样品的加标回收率分别为88.32%~94.12%和88.00%~93.29%,初步应用于复合B族维生素片和婴幼儿奶粉中叶酸含量的检测一致率分别为102.01%~114.72%和99.04%~111.62%,相对标准偏差均小于5%。本研究为快速检测叶酸含量提供了一种灵敏、特异、准确的方法,能够提高现场检测效率,对于营养强化剂含量的快速检测方法研究具有参考价值。
王耀;李燕飞;曹金博;杨喜燕;黄佳翔;黄明月;韩露;王凯乐;陈秀金;李兆周;张敏;康怀彬
河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000华南师范大学化学学院,广东广州510000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000河南科技大学食品与生物工程学院/河南省食品绿色加工与质量安全控制国际联合实验室,河南洛阳471000
轻工纺织
叶酸单克隆抗体酶联免疫吸附试验应用
《食品工业科技》 2026 (1)
P.339-347,9
国家自然科学基金项目(31702218)国家级大学生创新训练计划项目(202410464052)河南省高校青年骨干教师培养计划(2023GGJS046)河南省科技攻关项目(242102321131)河南省研究生教育改革与质量提升工程项目(HNYJS2020JD06)河南科技大学大学生创新创业训练计划项目(2024209)。
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