杂交狼尾草‘邦得1号’遗传转化体系的建立及应用OA

杂交狼尾草(Pennisetum glaucum×Pennisetum purpureum)具有生物量大、生长快、适应性强等优点,是我国畜牧生产中重要的多年生牧草。然而,其稳定高效的遗传转化体系尚未建立,严重制约了其抗逆基因功能解析与定向分子育种进程。为建立稳定高效的杂交狼尾草遗传转化体系,本研究以‘邦得1号’为材料,系统筛选外植体及其消毒方式、愈伤组织诱导条件、农杆菌菌株、菌液浓度、乙酰丁香酮(Acetosyringone,AS)浓度及侵染方式。结果表明,种子经75%乙醇和7.5%次氯酸钠处理后可获得无菌外植体并诱导胚性愈伤组织;采用EHA105、菌液OD_(600)为0.8、AS浓度150μmol·L^(-1),并结合谷氨酰胺(Glutamine,Gln)预处理和负压侵染,转化效率达33%。利用该体系成功获得导入ZmRR1、PpICE1-1等耐寒基因的阳性转化株。综上,优化侵染条件、提高胚性愈伤组织质量和抗性愈伤分化率,是提升转化效率的关键。该体系为杂交狼尾草抗逆基因功能研究和抗寒新品种选育提供技术支撑。