枳实导滞方对脓毒症胃肠功能障碍模型大鼠肠道菌群和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响OA

目的基于Toll样受体4/髓分化因子88/核因子-κB(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路和肠道菌群探讨枳实导滞方对脓毒症胃肠功能障碍模型大鼠炎症的影响及可能作用机制。方法60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、乌司他丁组及枳实导滞方低、中、高剂量组,每组10只。除假手术组外,其余各组大鼠采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症胃肠功能障碍大鼠模型。造模前3天和造模12 h后枳实导滞方低、中、高剂量组分别灌胃枳实导滞方溶液3.80、7.60、15.20 g/(kg·d),乌司他丁组腹腔注射乌司他丁10万U/kg,假手术组和模型组大鼠给予生理盐水1 ml/100 g灌胃,均每天1次,共4天。最后一次给药2 h后检测大鼠胃排空率和小肠推进率;造模24 h后ELISA法检测胃肠功能指标[D-乳酸(D-LA)、肠型脂肪酸结合蛋白(i-FABP)]及炎症指标[降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)]水平;比较肠道大肠杆菌、双歧杆菌和乳酸杆菌含量;HE染色法观察大鼠肠黏膜组织病理学形态改变;分别采用Western Blot法和qRT-PCR法检测大鼠回肠组织中IκB激酶(Ikk)、TLR4、Myd88、NF-κB蛋白及mRNA表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠胃排空率和小肠推进率降低,肠道中大肠杆菌数量及血清中D-LA、i-FABP、PCT、CRP水平升高,回肠组织中Ikk、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及其mRNA表达升高,肠道中乳酸杆菌、双歧杆菌数量降低(P<0.05),回肠组织出现明显病理损伤。与模型组比较,各药物干预组上述各指标均改善(P<0.05),肠黏膜损伤亦改善。与乌司他丁组比较,除枳实导滞方中剂量组D-LA外,枳实导滞方低、中剂量组上述各指标差异均具有统计学意义(P<0.05),而枳实导滞方高剂量组各指标与乌司他丁组差异无统计学意义(P>0.05)。枳实导滞方各剂量组大鼠胃排空率、小肠推进率、乳酸杆菌数量、双歧杆菌数量随剂量的增加而升高,血清D-LA、PCT、CRP水平和肠道组织Ikk、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平及大肠杆菌数量随剂量的增加而降低(P<0.05)。结论枳实导滞方具有改善脓毒症胃肠功能障碍大鼠肠黏膜损伤、保持菌群平衡、抑制炎症反应的作用,且以高剂量效果最好,这可能是通过下调TLR4/MyD88/NF-κB信号通路实现的。