银杏叶-赤芍提取物对“血瘀态”非酒精性脂肪性肝病大鼠的作用及机制研究OA

目的:观察银杏叶-赤芍提取物(GPE)防治非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血液流变学、炎症因子和内皮功能的影响,并采用主成分分析(PCA)和正交校正的偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)进一步筛选核心药效指标,探索其作用机制,为银杏叶-赤芍提取物防治NAFLD提供基础。方法:SD大鼠50只,按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、易善复137 mg/kg组、银杏叶-赤芍提取物45、90 mg/kg组,每组10只。采用高脂饲料喂养18周制备NAFLD模型。末次给药后,取下腔静脉血和肝脏。HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化及脂肪变性;全血流变仪检测大鼠血液流变学指标;散斑血流实时成像系统测定大鼠尾部微循环血流量;ELISA法检测肝匀浆中转化生长因子β1(TGF-β1)、血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症细胞因子和一氧化氮(NO)、血管内皮素1(ET-1)、血栓素B2(TXB2)及6-酮-前列环素F1α(6-Keto-PGF1α)等血管内皮功能指标。PCA和OPLS-DA等多元统计方法用于进一步筛选核心药效指标。Western blot法检测大鼠肝组织蛋白激酶B1(AKT1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)磷酸化水平和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果:18周后,与正常对照组比较,模型对照组大鼠全血黏度、血浆黏度(PV)、血沉(ESR)、红细胞压积(HCT)、红细胞聚集指数(EAI)、血浆TNF-α、血清IL-6、ET-1、NO、TXB2、肝组织TGF-β1含量、T/P比值明显升高(P<0.05或P<0.01),红细胞变形指数(EDI)、大鼠尾部血流灌注分布、6keto-PGF1α含量显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,银杏叶-赤芍提取物各组全血黏度、血浆黏度(PV)、血沉(ESR)、红细胞压积(HCT)、红细胞聚集指数(EAI)、血浆TNF-α、血清IL-6、ET-1、NO、TXB_(2)、肝组织TGF-β1含量及TXB_(2)/6-keto-PGF1α比值降低(P<0.05或P<0.01),红细胞变形指数升高(EDI),大鼠尾部血流灌注分布提高(P<0.05或P<0.01)。病理结果显示,银杏叶-赤芍提取物可减轻肝细胞脂质沉积,改善肝组织脂肪样变。PCA和OPLS-DA分析结果提示,血沉(ESR)、低切变率全血黏度(LS-WBV)和TXB2/6-keto-PGF1α是银杏叶-赤芍提取物抗NAFLD的意义指标。Western blot检测表明,银杏叶-赤芍提取物各组可显著下调肝组织AKT1、P38蛋白磷酸化的表达,下调VCAM-1、ICAM-1和VEGF蛋白表达。结论:银杏叶-赤芍提取物可通过缓解肝脏脂肪变性、改善血液流变学和微循环障碍,降低炎症反应,减轻血管内皮功能损伤,防治NAFLD。其机制可能是通过抑制AKT1、P38蛋白磷酸化表达,下调VCAM-1、ICAM-1和VEGF蛋白表达,进而调节血液黏稠度,改善NAFLD“血瘀态”有关。