羊源肺炎克雷伯菌可视化LAMP检测方法的建立OA
为快速检测肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,K.pneumoniae),利用环介导等温扩增(LAMP)技术和指示剂染料开发了一种可视化检测方法。针对K.pneumoniae的LuxR家族转录因子中的特异基因片段进行LAMP引物设计并对反应体系与程序进行优化。结果显示,在63℃、40 min反应条件下,可观察到最显著的LAMP可视化结果。该方法对K.pneumoniae阳性模板的检测灵敏度达到10^(2)copies/μL,且与其他九种常见细菌无交叉反应,具有较高的灵敏性和特异性。在小鼠模拟样本检测试验中,攻毒组样本和对照组样本可视化结果具有明显差异。最后,利用qPCR对LAMP检测结果进行对比验证,发现qPCR与LAMP检测在灵敏性、特异性及模拟样本检测能力方面具有很好的一致性,且LAMP检测时间比qPCR时间更短。以上结果表明,该LAMP方法具有较高的灵敏性和特异性,对K.pneumoniae感染具有良好的诊断能力,可为K.pneumoniae的临床检测提供技术支撑。
陈益妹;王子莹;吴丽莉;兰凤;焦玉清;章昱;黄紫荆;陈思;陈巧玲;满初日嘎;杜丽;王凤阳;高宏岩
海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228海南大学热带农林学院,海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室,海南海口570228
农业科技
肺炎克雷伯菌环介导等温扩增LuxR可视化检测
《动物医学进展》 2026 (10)
P.78-86,9
海南省金宁一院士创新中心项目农业农村部和财政部国家肉羊产业技术体系项目(CARS-38)海南大学科研启动基金[KYQD(ZR)22167]。
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