鸭去泛素化酶OTULIN通过负调控核因子κB信号通路影响肠炎沙门菌胞内增殖OA

为探究鸭去泛素化酶OTULIN(duOTULIN)对肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis,SE)胞内增殖的免疫调控作用及其与核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路的关系,通过聚合酶链反应扩增duOTULIN基因,构建pcDNA3.1-3×Flag-duOTULIN过表达载体,结合干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低技术,在鸭胚成纤维(duck embryo fibroblast,DEF)细胞中探究duOTULIN对NF-κB信号通路及SE感染的影响。结果表明:克隆得到的duOTULIN基因编码区全长1206 bp,在禽类中具有一定保守性。duOTULIN基因在心脏、肝脏、脾、肺、肾、十二指肠中均有表达,其mRNA在心脏中表达水平最高,其次为十二指肠。过表达duOTULIN可显著降低NF-κB信号通路关键分子和炎症因子NF-κB1、HOIP、RELA、IL-1β和TNF-α的表达水平(P<0.05),并促进SE在DEF细胞内的增殖(P<0.05);敲低duOTULIN则显著提升上述因子的表达水平(P<0.05),并减少SE在DEF细胞内的增殖(P<0.01)。综上所述,duOTULIN与SE胞内增殖调控相关,该调控作用可能依赖于NF-κB信号通路。研究结果可为禽类抗感染免疫研究提供参考和潜在靶点。