基于NLRP3/Caspase-1信号通路探讨除风益损汤对PM_(2.5)诱导干眼的作用机制OA

目的探讨除风益损汤通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路对细颗粒物(PM_(2.5))诱导干眼小鼠模型的作用。方法将小鼠随机分成空白组(NC组,10只)和造模组(30只),造模组予以双眼局部滴注PM_(2.5)悬浮液(5 mg·mL-1)28 d进行造模,造模成功后再随机分为模型组(PM_(2.5)组)、除风益损汤组(CFYSD组)、NLRP3抑制剂组(MCC950组),每组10只。CFYSD组予以除风益损汤(7.3 g·kg^(-1))灌胃,MCC950组予以MCC950(10 mg·kg^(-1))腹腔注射,NC组和PM_(2.5)组予以等量蒸馏水灌胃。给药28 d后,检测各组小鼠泪液分泌量、泪膜破裂时间(TBUT)、角膜荧光染色评分,后进行取材。HE染色观察角膜组织病理变化,ELISA检测血清活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶2(SOD2)水平,Western blot及qPCR检测角膜组织NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的蛋白及mRNA表达水平。结果与NC组相比,PM_(2.5)组泪液分泌量减少、TBUT缩短、角膜荧光染色评分增加(P<0.05);血清ROS、MDA水平升高,SOD2水平下降(P<0.05);角膜组织NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18的蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05)。与PM_(2.5)组相比,CFYSD组和MCC950组泪液分泌量增加、TBUT延长、角膜荧光染色评分下降(P<0.05);血清ROS、MDA水平下降,SOD2水平升高(P<0.05);角膜组织NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18的蛋白及mRNA表达水平下降(P<0.05)。HE染色结果显示,NC组小鼠角膜组织各层结构清晰,未见异常;与NC组相比,PM_(2.5)组小鼠角膜上皮细胞增生,细胞排列紊乱;与PM_(2.5)组相比,MCC950组与CFYSD组小鼠在角膜结构完整性和细胞形态方面明显改善。结论除风益损汤能增加PM_(2.5)诱导干眼小鼠模型的泪液分泌量、延长TBUT、减轻角膜组织病理改变,其作用机制可能为抑制氧化应激过程及NLRP3/Caspase-1信号通路的激活,干预NLRP3炎症小体组装,减少IL-1β、IL-18等促炎性细胞因子的成熟与释放,从而调控炎症反应,最终缓解干眼症状。