逍遥散通过SKN-1抗氧化通路改善秀丽隐杆线虫帕金森病模型α-突触核蛋白聚集和神经元损伤OA

目的探讨逍遥散(XYS)在秀丽隐杆线虫(C.elegans)帕金森病(PD)模型中的神经保护作用及其分子机制。方法采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导建立PD线虫模型,并结合α-突触核蛋白(α-syn)过表达转基因虫株(NL5901)进行验证。将线虫分为对照组、模型组及XYS低(25μg/mL)、中(50μg/mL)、高(100μg/mL)剂量组。通过生存曲线分析评估寿命;采用20 s内身体弯曲次数及基础减慢反应分别评价线虫的运动功能和食物相关行为;利用GFP标记的转基因虫株观察多巴胺能神经元损伤及α-syn聚集水平;采用二氢乙啶荧光探针(DHE)检测体内活性氧(ROS)水平,并结合RT-qPCR分析dat-1、cat-2、ced-9、gst-4及sod-3等相关基因表达;通过RNA干扰(RNAi)沉默skn-1表达,以验证XYS作用是否依赖于SKN-1/Nrf2信号通路。结果XYS可显著延长PD模型线虫寿命(P<0.001),增加第5天和第10天的20 s内身体弯曲次数(P<0.05),并改善基础减慢反应(P<0.05);XYS可减轻6-OHDA诱导的多巴胺能神经元损伤,提高dat-1、cat-2及ced-9表达水平(P<0.05),并降低α-syn聚集水平(P<0.001)。此外,XYS处理后降低ROS水平(P<0.05),sod-3及gst-4等抗氧化相关基因表达上调(P<0.05)。机制研究显示,XYS可增强skn-1::GFP及sod-3::GFP荧光信号(P<0.05)。在skn-1 RNAi条件下,脂质含量下降(P<0.05),且XYS对上述改变无明显改善作用(P>0.05);同时,XYS对sod-3::GFP荧光降低的恢复作用消失(P>0.05)。结论XYS可减轻氧化应激并抑制α-syn异常聚集,从而改善秀丽隐杆线虫PD模型神经功能,其作用可能与SKN-1/Nrf2相关抗氧化通路有关。