TRPC1/4/5抑制剂Pico145减轻小鼠脑缺血再灌注损伤后神经炎症OACHSSCD

目的探究瞬时电位通道C亚组(TRPC)1/4/5抑制剂Pico145对减轻小鼠脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法C57BL/6小鼠125只,随机分为假手术组、损伤组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组25只,改良神经缺陷评分(mNSS)实验、足误实验、转棒实验、TTC染色、Evans blue染色、TUNEL/NeuN染色实验评价药效。原代培养小胶质细胞,分为常氧组、氧糖剥夺/复氧(OGD/R)组、低浓度组、中浓度组和高浓度组。双波长钙成像实验检测TRPC1/4/5介导钙池调控钙离子进入(SOCE);ELISA检测白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CXC趋化因子配体1(CXCL1)、CC趋化因子配体2(CCL2)炎症因子水平。转录组测序及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析信号通路。Western blotting实验检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达。结果中剂量组和高剂量组mNSS、足误率、梗死体积、Evans blue染色体积低于损伤组,而转棒停留时间高于损伤组,高剂量组缺血半暗区TUNEL/NeuN阳性细胞数量低于损伤组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。中浓度组和高浓度组TRPC1/4/5介导的SOCE以及IL-1β、IL-6、TNF-α、CXCL1、CCL2等炎症因子水平低于OGD/R组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。转录组测序及KEGG分析结果显示,高浓度组与OGD/R组差异基因富集于NLRP3信号通路。高浓度组NLRP3水平低于OGD/R组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论TRPC1/4/5抑制剂Pico145可减轻大脑中动脉栓塞/再灌注损伤,其机制可能与减轻小胶质细胞炎症反应相关。