基于DIA定量蛋白组学技术解析DEHA诱导PCOS小鼠卵巢组织的蛋白质表达特征OA

目的采用数据非依赖性采集(DIA)定量蛋白组学技术,分析脱氢表雄酮(DHEA)诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢组织差异表达蛋白的谱学特征和调控机制。方法将3周龄C57BL/6小鼠随机分为对照组与PCOS模型组。模型组小鼠采用DHEA干预21 d后,同步开展血清睾酮检测、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)、动情周期监测验证模型表型,取卵巢组织通过DIA技术检测蛋白表达谱,结合生物信息学分析差异蛋白功能与调控网络。结果模型验证显示,PCOS组小鼠血清睾酮水平显著高于对照组(P<0.001),动情周期紊乱且无法界定有效周期时长,OGTT相关指标与对照组无显著差异(P>0.05)。共鉴定出10433种可信蛋白,其中1507种为差异表达蛋白(P<0.05),包括725种下调蛋白与782种上调蛋白。差异表达蛋白主要定位于细胞核、细胞质及分泌型蛋白,功能富集分析显示其参与细胞内代谢、卵巢性激素合成、胆固醇代谢及核苷酸糖合成等生物学过程,显著富集于RAP1、HIF-1、磷脂D及PPAR等信号通路,并涉及内吞作用、过氧化物酶体功能及溶酶体介导的调控机制。蛋白互作网络分析表明,EGFR、ALB、F2、CD44等为核心节点蛋白,其中EGFR关联蛋白达115种。下调最显著的差异蛋白CYP11A1(性激素合成限速酶)及上调关键蛋白IRS1、MELK等,可能是PCOS治疗的潜在靶点。结论DHEA连续注射21 d,成功构建以高雄激素血症、动情周期紊乱为核心特征的PCOS小鼠模型。其卵巢组织存在显著的蛋白质表达紊乱,核心差异蛋白主要涉及激素合成、能量代谢及信号传导通路。本研究为阐明PCOS的分子发病机制及开发卵巢靶向治疗药物提供了重要的蛋白质组学数据支撑。