ZNF473通过PI3K/AKT/c-Myc通路促进肝细胞癌的增殖与迁移OA

目的探讨锌指蛋白家族成员锌指蛋白473(ZNF473)对肝细胞癌(LIHC)增殖、迁移的影响及潜在作用机制。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析ZNF473在泛癌、LIHC组织与正常组织中的表达水平;通过Kaplan Meier Plotter数据库Log-rank检验分析ZNF473对LIHC患者预后影响;以HepG2、MHCC97-H细胞为研究对象,分阴性对照组(NC)和实验组(si-ZNF473),在HepG2、MHCC97-H中转染ZNF473干扰载体,采用CCK-8、Transwell实验及划痕愈合实验检测ZNF473对HepG2、MHCC97-H细胞增殖和迁移的影响;采用Western blot检测敲低ZNF473后LIHC细胞中磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、c-Myc蛋白、蛋白激酶B(AKT)等蛋白表达的变化。细胞实验所有数据均使用GraphPad Prism 9.0软件进行分析。结果TCGA数据库分析结果显示,ZNF473在包括LIHC在内的17种癌症中高表达。人蛋白图谱(HPA)数据库中的免疫组织化学(IHC)染色提示,ZNF473在LIHC组织中高表达。单细胞测序数据分析显示,ZNF473在恶性细胞亚群中的表达量高于其他细胞亚群。Kaplan-Meier Plotter数据库对LIHC患者的生存分析显示,ZNF473高表达组的总生存期(OS)、疾病特异性生存期(DSS)、无进展生存期(PFS)及无复发生存期(RFS)均显著短于低表达组。CCK-8实验表明敲低ZNF473后,HepG2、MHCC97-H细胞增殖能力下降;划痕愈合实验和Transwell实验结果显示,敲低ZNF473后HepG2、MHCC97-H细胞迁移能力下降。RT-qPCR结果显示,si-ZNF473组磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)相对表达量差异无统计学意义,磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、磷酸肌醇-3-激酶调节亚基1(PIK3R1)表达差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,下调ZNF473表达后p-AKT、c-Myc蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论ZNF473在LIHC细胞和组织中呈高表达,ZNF473表达可能通过调控PI3K/AKT/c-Myc通路促进LIHC细胞增殖、迁移。