贝莱斯芽孢杆菌D-3A发酵条件优化及对烟草青枯病防效OA

为筛选实验室前期保藏对烟草青枯病具有较高抑制作用的贝莱斯芽孢杆菌D-3A菌株发酵条件并明确生防作用。采用琼脂扩散法结合单因素法对D-3A菌株进行发酵条件筛选,并通过大田试验明确D-3A菌株对烟草青枯病的防效及促生效果。此外,通过PCR引物扩增法、结晶紫染色法对菌株的抗菌脂肽调控基因和生物膜形成能力及运动能力进行测定。结果表明,菌株筛选所得培养基配方为:酵母浸粉5 g/L、蛋白胨10 g/L、乳糖20 g/L;培养条件:装液量为60 m L、接菌量为0.05%、转速为240 r/min、温度为30℃、初始p H值为8,培养时间为48 h。发酵液和滤液抑菌圈直径分别为36.63、31.19 mm,比优化前分别提升75.10%、105.60%。贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)D-3A发酵液对烟草青枯病的大田平均防效为63.23%。该菌株可产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶,且具有固氮、解钾等活性,其发酵液对烟草具有促生作用。此外,D-3A菌株具有surfactin、fengycin、iturin等物质的合成酶调控基因,并具有较强的生物膜形成能力和运动能力(泳动运动能力>群集运动能力>抽动运动能力),利于菌株的定植和运动。说明贝莱斯芽孢杆菌D-3A对烟草青枯病具有较好的防治效果,经对其发酵条件的优化使其发酵液和发酵上清滤液的抑菌活性显著增强,并对烟草的生长具有一定的促进作用,后续可用于农业生产。