大黄素通过铜稳态失衡介导人肝癌Hep3B细胞死亡的机制研究OA

目的:明确大黄素(Em)是否能干扰肝癌细胞Hep3B铜稳态,并探究其导致细胞死亡的作用机制.方法:将Hep3B细胞分为对照组、给药组、四硫代钼酸铵(ATTM)预处理+给药组,通过CCK-8法、流式细胞术、显微镜观察、细胞划痕实验、ICP-MS法、Western blot法、试剂盒法检测各组细胞存活率、凋亡情况、形态学、迁移率、铜水平等相关指标水平变化.结果:与对照组比较,Em能够有效抑制肝癌细胞Hep3B生长,促进凋亡,降低迁移率,提高细胞内铜水平,降低细胞内铁氧还蛋白1(FDX1)、硫辛酸合酶(LIAS)、二氢硫辛酰胺S-乙酰转移酶(DLAT)、二氢硫辛酰胺S-琥珀酰转移酶(DLST)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、铜转运酶ATPβ亚基(ATP7B)、70kDa热休克蛋白(HSP70)、还原型/氧化型谷胱甘肽比值(GSH/GSSG)水平,提高细胞内丙酮酸(PA)、α-酮戊二酸(α-KG)、活性氧簇(ROS)、过氧化氢(H2O2)水平.利用铜螯合剂ATTM预处理能够减轻Em引起的细胞毒性,降低细胞内铜水平,提高细胞内FDX1、LIAS、DLAT、DLST、SOD1、ATP7B、HSP70、GSH/GSSG水平,降低细胞内PA、α-KG、ROS、H2O2水平.结论:Em能够通过提高细胞内铜水平,促使肝癌细胞Hep3B发生铜死亡.