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表达尼帕病毒F和G囊膜糖蛋白的VSV假病毒的构建与优化OA

Construction and optimization of a recombinant vesicular stomatitis virus pseudovirus expressing Nipah virus F and G envelope glycoproteins

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为在较低生物安全等级条件下安全、有效地研究尼帕病毒(NiV),本研究旨在构建一种携带报告基因、并能模拟NiV入侵过程的假病毒模型.采用已有的基于水疱性口炎病毒(VSV)的假病毒体系rVSV-ΔG-EGFP,该体系的病毒基因组中以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)替代VSV的G糖蛋白基因.在细胞中通过外源方式表达NiV的F和G囊膜蛋白后,利用该体系包装假病毒并感染细胞,成功包装重组假病毒rVSV-ΔG-NiV F/G-EGFP.通过透射电镜与Western-blot验证了假病毒颗粒包装成功及囊膜蛋白的正确表达.中和试验证实,该假病毒可被NiV特异性中和抗体有效抑制.本研究构建的假病毒系统为尼帕病毒的中和抗体评价、药物筛选及入侵机制研究提供了安全有效的技术平台.

To enable safe and effective Nipah virus(NiV)studies under lower biosafety conditions,this research aimed to construct a pseudovirus model that carried a reporter gene and mimics the NiV invasion process.This study utilized the established rVSV-ΔG-EGFP pseudovirus system based on vesicular stomati-tis virus(VSV),where the VSV G glycoprotein gene was replaced with enhanced green fluorescent protein(EGFP)in the viral genome.Following exogenous expression of NiV F and G proteins in cells,cells were transfected with the rVSV-ΔG-EGFP backbone to package the recombinant pseudovirus rVSV-ΔG-NiV F/G-EGFP.Transmission electron microscopy and Western-blot analysis confirmed successful packaging of the pseu-dovirus particles and correct expression of the envelope proteins.Neutralization assays demonstrated that this pseudovirus could be effectively inhibited by NiV-specific neutralizing antibodies.The con-structed pseudovirus system provides a safe and effective technical platform for evaluating NiV neutral-izing antibodies,screening therapeutic candidates,and investigating viral entry mechanisms.

邝瑞欣;宋翠萍;丁铲;孙英杰;徐瑞娟;田雨菲;刘彦峰;赵飞杨;屈阳;廖瑛;仇旭升;谭磊

福建农林大学 动物科学学院,福建 福州 350002中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241福建农林大学 动物科学学院,福建 福州 350002||中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241福建农林大学 动物科学学院,福建 福州 350002福建农林大学 动物科学学院,福建 福州 350002中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241中国农业科学院 上海兽医研究所,上海 200241

农业科技

尼帕病毒假病毒水疱性口炎病毒囊膜蛋白

Nipah viruspseudovirusvesicular stomatitis virusviral envelope proteins

《中国兽医科学》 2026 (9)

1195-1201,7

中国农业科学院科学中心项目(CAAS-CSLPDCP-202402)国家重点研发计划项目(2022YFD1801500)

10.16656/j.issn.1673-4696.2026.0120

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