桃红四物汤对四肢开放性骨折模型骨愈合能力及PI3K/AKT信号通路的影响OA

目的:探究桃红四物汤对大鼠四肢开放性骨折愈合能力及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路的影响。方法:将40只雄性大鼠随机分为空白组(BL组)、模型组(MO组)、桃红四物汤低剂量组(LDE组,5 mL·kg^(-1)·d^(-1))和桃红四物汤高剂量组(HDE组,10 mL·kg^(-1)·d^(-1)),每组10只。除BL组外,其余大鼠采用股骨干中段短斜形截断+克氏针髓内固定法制备四肢开放性骨折模型。造模成功后,LDE组和HDE组大鼠以相应剂量灌胃桃红四物汤,BL组和MO组灌胃生理盐水,连续28 d。采用电子拉力检测仪检测大鼠股骨最大承受力与骨韧性;HE染色法观察骨痂形成;Western blot检测股骨组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达水平;GBHA法测定血钙含量;磷钼酸法测定血磷含量;ELISA测定血清骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)、骨钙素(bone gla protein,BGP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8水平;免疫组化法检测股骨组织VEGF表达水平。结果:与BL组比较,MO组大鼠股骨最大承受力与骨韧性显著降低(P<0.05),HE染色显示透明软骨组织明显增加,PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、VEGF蛋白表达水平显著降低(P<0.05),血清钙、磷、BALP、BGP水平显著降低(P<0.05),血清TNF-α、IL-6、IL-8水平显著升高(P<0.05)。与MO组比较,LDE组和HDE组大鼠股骨最大承受力与骨韧性显著升高(P<0.05),HE染色显示新骨形成增加,PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、VEGF蛋白表达水平显著升高(P<0.05),血清钙、磷、BALP、BGP水平显著升高(P<0.05),上述炎症因子水平显著降低(P<0.05),且HDE上述效应均较LDE组更为显著(P<0.05)。结论:桃红四物汤可能通过激活PI3K/AKT信号通路,从而促进四肢开放性骨折大鼠新骨形成和骨愈合。