补肾助孕方对胚胎着床障碍模型小鼠子宫组织JAK2/STAT3信号通路及巨噬细胞极化的影响OA

目的从非受体型酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路探讨补肾助孕方对胚胎着床障碍模型小鼠子宫组织巨噬细胞极化的影响。方法将50只雌性和25只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、补肾助孕方低剂量及高剂量组、地屈孕酮组,每组10只雌鼠、5只雄鼠。除空白组外,将其余各组处于动情间期的雌鼠诱导超促排卵后,于当日18:00与雄鼠按照2∶1比例合笼,次日检查雌鼠阴道脱落细胞见精虫计为妊娠第1天,再于妊娠第4天在颈部皮下注射米非司酮油剂建立胚胎着床障碍模型。雌鼠自妊娠第1天开始干预,补肾助孕方低、高剂量组分别给予补肾助孕方溶液11.18、22.36 g/kg灌胃,地屈孕酮组给予地屈孕酮溶液2.6 mg/kg灌胃,空白组、模型组给予生理盐水10 g/kg灌胃,均每日1次,干预至妊娠第4天。于妊娠第5天取材,采用HE染色法观察雌鼠子宫内膜病理学形态,并检测子宫内膜厚度和腺体数量;流式细胞术检测子宫组织M1、M2型巨噬细胞比例;ELISA法检测子宫组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-10(IL-10)水平;Western Blot法检测子宫组织JAK2、磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化信号转导及转录激活因子3(p-STAT3)蛋白水平;实时荧光定量PCR法检测子宫组织JAK2、STAT3、IL-10、TGF-β1 mRNA表达。结果与空白组比较,模型组子宫内膜腺腔小而直、间质致密、血管分布稀少,子宫内膜厚度变薄、腺体数量减少;子宫组织M1型巨噬细胞比例升高,M2型巨噬细胞比例及IL-10、TGF-β1水平降低,JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白水平及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值降低,JAK2、STAT3、IL-10、TGF-β1 mRN表达降低(P<0.05)。与模型组比较,补肾助孕方低、高剂量组上述指标均有所改善,地屈孕酮组部分指标改善(P<0.05)。在改善子宫内膜病理学形态、内膜厚度、腺体数量,子宫组织M1型巨噬细胞比例及TGF-β1水平,JAK2、p-JAK2、p-STAT3蛋白水平,p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2比值,JAK2、IL-10、TGF-β1 mRNA表达方面,补肾助孕方高剂量组效果优于地屈孕酮组和补肾助孕方低剂量组(P<0.05)。结论补肾助孕方可改善胚胎着床障碍模型小鼠着床期子宫内膜形态,其机制可能与特异性调节JAK2/STAT3信号通路,干预巨噬细胞极化,促进抑炎因子的表达有关。