基于miR-146a-5p/TLR4/NF-κB通路探讨通督调神灸对脊髓损伤大鼠脊髓组织炎症的影响OA

目的观察通督调神灸对脊髓损伤大鼠脊髓组织炎症及微小RNA-146a-5p(miR-146a-5p)/Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响,探讨其作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、艾灸组,每组12只。模型组和艾灸组采用改良Allen’s法制备脊髓损伤模型。造模成功后,艾灸组大鼠取百会、大椎、命门穴进行悬灸,1次/d,连续干预14 d;对照组与模型组不进行干预。术后第1,3,7,14天,采用Basso-Beattie-Bresnahan运动功能量表(BBB)评分评价大鼠运动功能;末次干预结束后,HE染色观察脊髓组织病理形态,Western blot法检测脊髓组织中TLR4、NF-κB蛋白表达情况,RT-qPCR法检测脊髓组织中miR-146a-5p表达情况,ELISA法检测脊髓组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果术后第3天、第7天、第14天,艾灸组大鼠BBB评分均明显高于同期模型组(P均<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠脊髓损伤区域可见广泛神经元坏死,伴有大量炎性细胞浸润及组织水肿;脊髓组织中TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量及IL-6、TNF-α含量均明显升高(P均<0.05),miR-146a-5p相对表达量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组大鼠脊髓组织病理损伤减轻,炎性细胞浸润减少;脊髓组织中TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量及IL-6、TNF-α含量均明显降低(P均<0.05),miR-146a-5p相对表达量明显升高(P<0.05)。结论通督调神灸可能通过上调miR-146a-5p表达,抑制TLR4/NF-κB信号转导,减少促炎因子释放,从而改善脊髓损伤炎症微环境,促进神经功能恢复。