托珠单抗对脓毒症小鼠肝细胞凋亡的影响OA

目的探讨白介素-6受体抑制剂托珠单抗对脓毒症小鼠肝细胞凋亡的影响及分子机制。方法36只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC组)、模型组(LPS组)和托珠单抗治疗组(LPS+TCZ组),每组12只。采集各组小鼠血清和肝组织,检测小鼠血清ALT和AST评估肝功能;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化;TUNEL染色观察肝细胞凋亡;基于生物信息学分析结果,采用qRT-PCR验证差异基因apaf1、caspase-3及caspase-8 mRNA表达情况。结果通过生物信息学分析发现,在脓毒症肝损伤过程中涉及的差异基因主要参与了核糖核蛋白复合体合成、细胞自噬、细胞氨基酸代谢、氧化应激和内、外源性细胞凋亡等生物过程;尤其是trp53、apaf1、caspase-8、bcl2、bax凋亡关键基因在脓毒症肝损伤中可能发挥关键作用。通过LPS诱导建立脓毒症小鼠模型并给予TCZ处理后发现:肝脏组织炎症反应明显减轻,仅部分细胞肿胀;血清ALT和AST水平较模型组降低(F_(ALT)=331.32,P<0.0001;F_(AST)=174.69,P<0.0001);经Tunel染色后发现LPS+TCZ组肝组织中凋亡阳性细胞数量较LPS组减少,阳性信号散在分布且染色强度较弱,肝细胞凋亡受到抑制,提示托珠单抗的治疗能部分逆转肝损伤的程度,但尚未完全恢复至正常。qRT-PCR检测发现,与脓毒组(LPS组)相比,肝脏中Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达均下调(F_(Caspase-3)=64.67,F_(Caspase-8)=17.91,均P<0.001),Apaf1mRNA表达差异无统计学意义(F=1.73,P>0.05);与NC组比较,Apaf1mRNA表达则明显增多。结论生物信息学分析发现,在脓毒症肝损伤过程中涉及的差异基因可能通过炎症因子的过度释放、代谢产物的积累、氧化应激和内、外源性细胞凋亡等途径导致肝细胞的进一步损伤和凋亡;托珠单抗可能主要通过抑制Caspase-8的表达,并可能潜在地影响Apaf1信号,进而下调凋亡执行因子Caspase-3的表达,从而减少肝细胞凋亡,减轻LPS诱导的脓毒症肝脏损伤。