基于NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路探讨电针干预对hSOD1^(G93A)转基因小鼠星形胶质细胞活化的影响OA

目的观察电针调控NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteine-aspartic protease-1,Caspase-1)/白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)通路对星形胶质细胞活化的影响,探讨电针干预足三里穴改善肌萎缩侧索硬化症运动功能及神经保护可能的作用机制。方法选取24只雄性hSOD1^(G93A)转基因小鼠随机分为模型组、电针组、药物组,同窝非转基因野生小鼠作为对照组,每组8只。电针组选取“足三里”穴治疗10分钟,药物组予利鲁唑溶液8 mg/kg灌胃,模型组和对照组予以同样抓取后固定10分钟,以上干预均1次/日,3次/周,共4周。爬杆实验和旷场实验测试hSOD1^(G93A)转基因小鼠的运动功能,尼氏染色观察小鼠脊髓前角运动神经元病理损伤情况,免疫荧光法检测小鼠脊髓组织星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)荧光强度,蛋白质印迹法检测小鼠脊髓组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、Caspase-1、IL-1β蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测小鼠脊髓组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)含量。结果与对照组相比,模型组小鼠运动功能明显下降,小鼠脊髓前角神经元病理损伤严重,小鼠脊髓组织GFAP荧光强度、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白表达升高(P<0.01),TNF-α、iNOS含量升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组与药物组小鼠运动功能提升,脊髓前角运动神经元损伤改善,小鼠脊髓组织GFAP荧光强度、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),TNF-α、iNOS含量降低(P<0.05,P<0.01)。结论电针干预足三里穴对hSOD1^(G93A)转基因小鼠运动功能及运动神经元具有一定的改善和保护作用,其作用机制可能与NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路调节星形胶质细胞活化、降低神经炎症有关。