补阳还五汤水提物通过JNK/c-Jun信号通路减轻H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞凋亡OA

目的基于c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)/c-Jun信号通路探讨补阳还五汤水提物对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用最佳浓度200μmol/L的H_(2)O_(2)处理PC12细胞构建氧化应激体外细胞模型。设正常组、模型组、补阳还五汤(BHD)低、中、高剂量组、SP600125组,采用SP600125和不同浓度的BHD培养基对PC12细胞进行处理。利用实时细胞分析(RTCA)系统及CCK-8法检测细胞增殖情况;免疫荧光及流式细胞仪检测细胞内活性氧水平及细胞凋亡情况;蛋白质印迹检测细胞内促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、促凋亡蛋白半胱氨酸依赖性天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Cysteine-dependent aspartate-specific protease-3,Caspase-3)、抗凋亡蛋白Bcl-2、c-Jun、p-c-Jun、p-JNK、JNK蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组活性氧水平、细胞凋亡率、Bax和Caspase-3蛋白表达、p-JNK/JNK和p-c-Jun/c-Jun明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,高剂量BHD干预后活性氧水平、细胞凋亡率、Bax和Caspase-3蛋白表达、p-JNK/JNK和p-c-Jun/c-Jun显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论补阳还五汤水提物可通过JNK/c-Jun信号通路抑制氧化应激介导的PC12细胞凋亡,揭示了补阳还五汤可通过促进神经损伤修复而改善难治性勃起功能障碍的潜在作用机制。