范可尼贫血互补群D2基因在人胸膜间皮瘤中的表达及临床意义OA

目的:探讨范可尼贫血互补群D2(fanconi anemia complementation group D2,FANCD2)基因在胸膜间皮瘤(pleural mesothelioma,PM)中的表达水平及敲低FANCD2基因对PM细胞NCI-H2052增殖和迁移的影响。方法:应用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库下载PM基因表达数据、临床病理数据与生存状态数据;使用R语言、Perl软件等程序包作FANCD2在PM中的差异分析、临床病理相关性分析、COX单因素和多因素分析、免疫浸润分析及基因富集分析。采用qRT-PCR和WB检测间皮瘤细胞中FANCD2的表达水平。通过CCK-8、克隆形成实验、划痕实验及细胞周期检测评估敲低FANCD2对PM细胞NCI-H2052增殖与迁移能力的影响。结果:生信分析和体外细胞学实验结果表明,与正常对照组织和人正常间皮细胞Met-5A相比,不同类型的PM组织和PM细胞中FANCD2基因明显高表达(P<0.001);FANCD2表达量与PM肿瘤分期具有明显相关性(P<0.05);FANCD2基因高表达与PM患者预后不良正相关(P<0.001);FANCD2基因高表达与PM中M2巨噬细胞等浸润水平正相关(P<0.05),并在细胞周期、卵母细胞减数分裂、细胞衰老等通路明显富集。在PM细胞NCI-H2052中通过siRNA敲低FANCD2基因表达能导致细胞周期G1/S期阻滞,并明显抑制PM细胞增殖和迁移。结论:FANCD2在PM组织中高表达,是判断PM预后的良好指标之一,敲低FANCD2基因表达能导致细胞周期G1/S期阻滞,并明显抑制PM细胞增殖和迁移。