基于网络药理学和实验验证研究蒲公英颗粒保护小鼠急性肺损伤的作用机制OA

目的:基于网络药理学、分子对接和体、内外实验探讨蒲公英颗粒(Taraxacum mongolicum granules,TMG)治疗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用机制。方法:采用网络药理学筛选TMG治疗ALI的关键靶点,预测TMG治疗ALI相关通路,构建“药物-活性成分-靶点”网络图,通过分子对接预测核心成分与关键靶点的结合能力。通过体内、外实验验证网络药理学分析结果。体内实验采用腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立小鼠ALI模型,分为Control组、LPS组、TMG低/中/高剂量组、盐酸地塞米松(dexamethasone,Dex)组,每组10只。给药5 d后检测肺组织H&E、免疫组化等病理染色,ELISA检测小鼠BALF中IgM、IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α表达,Western blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、GSDMD蛋白表达,RT-qPCR检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达。体外实验采用LPS+尼日利亚菌素钠盐建立MH-S细胞焦亡模型,分为Control组、Model组、TMG低/中/高剂量组、Dex组,RT-qPCR检测IL-1β、IL-18、IL-6、TNF-α、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达,Western blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、GSDMD蛋白表达。结果:网络药理学显示SRC、PIK3R1、HSP90AA1、AKT1、MAPK1、TNF、IL-1β、TLR4等是治疗ALI的关键靶点。分子对接表明TGM与TNF、IL-1β、TLR4、SRC、MAPK1具有较高的亲和力。KEGG富集在Toll样受体信号通路、NOD-like等炎症通路。体内实验表明TMG可以减轻肺组织病理损伤,减少炎症因子释放,抑制NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、GSDMD的表达。体外实验表明TMG可以减少MH-S细胞炎症因子释放,抑制NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD-N、GSDMD表达。结论:TMG可改善LPS诱导小鼠ALI炎症反应,保护肺组织,减少炎症因子释放,其作用机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导的肺泡巨噬细胞焦亡有关。