基于分子对接与SPR实验研究祛风通络药对天麻-附子中黄酮酚化合物与CNR结合的亲和力OA

目的以大麻素受体(cannabinoid receptor,CNR)为靶标,通过虚拟筛选和表面等离子共振实验(surface plasmon resonance,SPR),从祛风通路药对天麻-附子中筛选治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的小分子黄酮酚化合物(配体),比较小分子化合物与CNR1和CNR2结合的差异性。方法通过UPLC-MS非靶向代谢组学技术获取天麻-附子中3种黄酮酚化合物,即大豆苷、大豆苷元和姜黄素,确定为小分子化合物(配体)。运用分子对接研究3种黄酮酚化合物与CNR的结合模式,并进一步预测其药动学性质、类药性和毒性。采用分子动力学模拟评估3种小分子化合物与CNR1或CNR2结合稳定性的差异性。最后,采用SPR实验验证3种黄酮酚小分子化合物与CNR1或CNR2结合的稳定性。结果分子对接与分子动力学模拟结果显示,大豆苷-CNR2、大豆苷元-CNR2和姜黄素-CNR2复合物的稳定性分别高于大豆苷-CNR1、大豆苷元-CNR1和姜黄素-CNR1复合物。SPR实验结果证实,大豆苷-CNR2复合物的值10.19μmol低于大豆苷-CNR1复合物的值19.67μmol,提示大豆苷-CNR2复合物的结合稳定性高于大豆苷-CNR1复合物。结论经高通量生物信息技术与SPR实验证实,与CNR2结合稳定性较高的天麻-附子活性成分为大豆苷。研究为天麻-附子活性成分治疗类风湿性关节炎提供了新借鉴。