玉女煎治疗口腔溃疡的潜在作用机制及效果——基于网络药理学和动物实验的研究OA

目的探讨玉女煎治疗口腔溃疡的潜在作用机制及效果。方法(1)通过中药系统药理学数据库与分析平台、BATMAN-TCM数据库获取玉女煎中药组分的活性成分及作用靶点,通过GeneCards^(®)数据库、OMIM^(®)数据库、DrugBank数据库、PharmGKB数据库获取口腔溃疡相关靶点,取两者的交集靶点。采用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点网络,筛选关键活性成分。通过STRING数据库构建交集靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,筛选核心靶点。利用Metascape数据库对交集靶点进行基因本体论功能富集分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析。使用AutoDock Vina工具进行分子对接验证。(2)将40只SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组、玉女煎高剂量组、玉女煎中剂量组、玉女煎低剂量组,每组8只。除对照组外,使用50%冰醋酸在其余组大鼠下切牙牙槽骨唇侧黏膜处制备口腔溃疡模型。于实验第2天开始给药,分别给予玉女煎高剂量组、玉女煎中剂量组、玉女煎低剂量组12.8 g/kg、6.4 g/kg、3.2 g/kg玉女煎药液灌胃,给予对照组和模型组等体积生理盐水灌胃,连续7 d。比较实验第3、5、7天各组大鼠口腔溃疡面积。于实验第8天采用HE染色观察大鼠溃疡组织病理变化,采用ELISA检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平。结果(1)玉女煎中药组分的活性成分共51个,中药作用靶点共440个,口腔溃疡相关靶点共2613个,交集靶点共241个。玉女煎治疗口腔溃疡的关键活性成分包括槲皮素、豆甾醇、山柰酚、汉黄芩素,核心靶点为p53抑癌基因、RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、Jun原癌基因等。交集靶点主要涉及对激素的反应、对外源物质的反应等生物学过程,膜筏、囊泡腔、突触前膜等细胞组分,氧化还原酶活性、转录因子结合等分子功能,糖尿病并发症中的晚期糖基化终产物-晚期糖基化终产物受体信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路、核因子κB信号通路等信号通路。分子对接结果显示,大部分关键活性成分与核心靶点蛋白的结合能≤-5 kcal/mol。(2)实验第5、7天,玉女煎高剂量组、玉女煎中剂量组大鼠的口腔溃疡面积小于模型组(P<0.05)。不同玉女煎剂量组大鼠的血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于模型组(P<0.05)。HE染色结果显示,模型组大鼠的口腔黏膜结构破坏,上皮剥脱,炎性细胞浸润,而不同玉女煎剂量组大鼠的口腔溃疡组织病变程度明显轻于模型组。结论玉女煎能有效治疗口腔溃疡,且治疗作用具有多成分、多靶点、多通路的特点。