基于Nrf2/HO-1/NQO1通路介导的铁死亡途径探讨右美托咪定对LPS介导的BV2细胞神经炎症和增殖迁移的影响OA

目的:探讨右美托咪定(Dex)预处理是否通过激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路,抑制脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞铁死亡,进而影响其神经炎症反应和迁移能力。方法:使用CCK8法研究Dex和LPS作用于BV2小胶质细胞最佳浓度;使用10、15、20μg/mL Dex进行Transwell、划痕和克隆形成实验评估细胞迁移、愈合和增殖能力;采用蛋白质免疫印迹法检测Nrf2、HO-1、NQO1以及铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达。设置Control、Model组,在Model组基础上分为Dex(15μg/mL)、ML385(Nrf2抑制剂组)、ML385+Dex组别,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;试剂盒检测氧化应激指标丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、铁离子(Fe^(2+))含量;免疫荧光检查活性氧(ROS)和Fe^(2+)水平。结果:1μg/mL LPS显著抑制BV2细胞活力(P<0.05),而Dex在剂量5、15、20、25μg/mL时能剂量依赖性地逆转LPS诱导的细胞活力抑制作用(P<0.01);10、15、20μg/mL Dex均能显著促进LPS刺激下BV2细胞的迁移能力、划痕愈合率及克隆形成数目(P<0.001),剂量依赖性地上调Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达(P<0.001);Dex组显著抑制IL-6、IL-1β、TNF-α炎症因子表达(P<0.05),抑制氧化应激指标MDA、ROS水平(P<0.001),提高GSH水平(P<0.001),提高铁死亡蛋白GPX4,下调ACSL4和Fe^(2+)表达(P<0.01);Nrf2抑制剂ML385可部分抵消Dex的上述保护作用(P<0.05)。结论:右美托咪定预处理可能通过激活Nrf2/HO-1/NQO1信号通路,抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞铁死亡过程,从而减轻神经炎症反应并调节细胞增殖和迁移能力。