Tanespimycin与小分子化合物联合调控微管蛋白α-tubulin乙酰化诱导A549细胞凋亡研究OACHSSCD

坦螺旋霉素(tanespimycin)作为分子伴侣Hsp90(Heat shock protein)的一种抑制剂,因其单药及联合用药的作用机制尚未完全明确,因此其在肺癌治疗中的临床应用受到限制。本研究证实,tanespimycin能够有效诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡。蛋白质印迹实验显示,tanespimycin单药处理A549细胞可诱导凋亡相关蛋白(含Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3和PARP)的切割活化、线粒体膜蛋白VDAC及Bax表达上调,同时提升乙酰化微管蛋白α-tubulin(Ac-α-tubulin)与蛋白激酶AMPK的表达水平,并诱导细胞周期G1/S阻滞。通过Acetyl-CoA ELISA试剂盒定量检测发现,tanespimycin能以剂量和时间依赖的方式增加细胞内乙酰辅酶A含量。Tanespimycin与mTOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-mA)及凋亡抑制剂(Z-vad)的联合实验证实,Ac-α-tubulin表达水平与细胞凋亡程度呈正相关。组蛋白去乙酰化酶HDAC6抑制剂曲古抑菌素A(TSA)与tanespimycin联合,尽管能增强Ac-α-tubulin表达水平和降低细胞活力,但却会削弱tanespimycin诱导的Caspases活化。本研究为探索tanespimycin与特定小分子药物联合促进肺癌细胞凋亡提供了实验依据。