基于GRP78/CHOP-内质网应激轴探讨四妙散改善肥胖合并高尿酸血症大鼠足细胞凋亡的机制OA

目的:探讨四妙散对肥胖合并高尿酸血症大鼠足细胞凋亡的干预作用及其可能机制。方法:将48只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,四妙散低、中、高剂量组(1.09、2.19、4.37 g·kg^(-1))及别嘌醇组(0.02 g·kg^(-1))。除正常组外,其余各组采用高脂饲料诱导肥胖模型后,采用皮下注射氧嗪酸钾(0.5 g·kg^(-1))联合灌胃腺嘌呤(0.1 g·kg^(-1),以0.5%CMC-Na溶液混悬)以制备高尿酸血症动物模型,各给药组灌胃干预30 d。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏病理学改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清尿酸(SUA)、肌酐(SCr)、尿蛋白及炎症因子水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)及免疫组化(IHC)检测肾组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路及凋亡相关分子的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、SUA、SCr、24 h尿蛋白定量(24 h UPT)、尿白蛋白/肌酐比值(ACR)、血脂[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]及血清炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]均显著升高(P<0.01);肾脏病理损伤明显,足细胞标志蛋白Nephrin及抗凋亡蛋白Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),而GRP78、磷酸化(p)-蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/PERK、p-真核细胞起始因子2α(eIF2α)/eIF2α、激活转录因子4(ATF4)、CHOP及促凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)的表达均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,四妙散各剂量组及别嘌醇组上述指标均明显改善(P<0.05,P<0.01),其中四妙散高剂量组效果最为显著。结论:四妙散可改善肥胖合并高尿酸血症大鼠的肾功能和足细胞损伤,其机制可能与抑制GRP78介导的PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路,减轻内质网应激诱导的足细胞凋亡有关。