基于肠道菌群-Nrf2/NF-κB/MAPK轴探讨鸡眼草提取物对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用OA

目的:探讨鸡眼草提取物对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤(ALI)小鼠炎症反应、氧化应激及肠道菌群的影响。方法:60只雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯(150 mg·kg^(-1))组和鸡眼草提取物高、中、低剂量组(600、400、200 mg·kg^(-1)),每组10只。连续灌胃给药14 d,末次给药2 h后腹腔注射0.2%CCl4-橄榄油溶液建立ALI模型,16 h后收集血清、肝脏组织及盲肠内容物。检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活力及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的水平;测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力及丙二醛(MDA)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中磷酸化核转录因子-κB p65(p-NF-κB p65)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化c-Jun N末端激酶(p-JNK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)的表达水平;16S rDNA高通量测序技术检测盲肠内容物中的肠道菌群变化。结果:鸡眼草提取物中、低剂量组可明显降低急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活力及TNF-α、IL-6水平(P<0.05,P<0.01);提高肝组织SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);改善肝组织病理损伤。同时,鸡眼草提取物能上调肝组织中Nrf2、HO-1蛋白表达,下调Keap1及p-NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-ERK和p-JNK蛋白表达(P<0.05,P<0.01),并改善肠道菌群紊乱。结论:鸡眼草提取物对CCl4诱导的小鼠ALI具有显著保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路减轻氧化损伤、调控核转录因子-κB(NF-κB)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制炎症反应,以及通过肠-肝轴改善肠道菌群失调等多途径有关。