Claudin-18.2在胃癌中的表达及其生物学行为的研究OA
Expression of Claudin-18.2 in Gastric Cancer and the Protein's Biological Behavior
目的:探索紧密连接蛋白 18.2(Claudin-18.2,CLDN18.2)过表达对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭等恶性表型的影响并检测其在肿瘤组织中的表达情况.方法:通过慢病毒转染构建稳定过表达人源 CLDN18.2 的小鼠胃癌细胞(mouse forestomach carcinoma,MFC)及人胃腺癌细胞(adenocarcinoma gastric cells,AGS),并设空载转染对照.通过蛋白质印迹和免疫荧光技术验证蛋白表达.利用 CCK-8法、平板克隆形成实验评估细胞增殖能力;采用 Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力.采用免疫荧光技术检测人胃癌组织芯片 CLDN18.2 蛋白表达水平.结果:成功构建稳定高表达 CLDN18.2 蛋白的 MFC 和 AGS 细胞系,细胞免疫荧光验证了 CLDN18.2 蛋白定位于细胞膜.过表达组较空载对照组增殖显著增强[MFC:自第 4 天起 P<0.05(第 4 天 P<0.05,第 5 天 P<0.01);AGS:第 3～5 天均 P<0.001)],克隆形成率分别提高至 MFC:21.07%vs 13.33%和 AGS:47.53%vs 36.53%(均 P<0.05),迁移细胞数分别增加至MFC:1.56 倍和AGS:1.53 倍(均P<0.01),侵袭细胞数分别增加MFC:20.01%和AGS:18.81%(均P<0.05).人胃癌组织芯片检测显示,胃癌原发灶中 CLDN18.2 蛋白表达水平显著高于配对癌旁胃黏膜组织(P<0.01),转移灶中 CLDN18.2 表达呈两极化分布.结论:CLDN18.2 蛋白过表达在体外促进胃癌细胞的增殖、克隆形成、迁移及侵袭,组织芯片验证了 CLDN18.2 在胃癌组织中的异常表达及其在转移灶中的异质性.目前研究结果支持 CLDN18.2作为抗肿瘤治疗靶点的可能性.
Objective:To investigate the impact of tight junction protein 18.2(Claudin-18.2,CLDN18.2)overex-pression on malignant phenotypes,including proliferation,mi-gration,and invasion,in gastric cancer cells,and examine its expression in tumor tissues.Methods:Stable cell lines over-expressing human CLDN18.2 were established via lentiviral transduction in MFC and AGS cell lines.Cells transfected with the empty vector(Empty)served as controls.Protein expression was verified by Western blot and immunofluorescence.Cell proliferation was assessed using the CCK-8 assay and plate colony formation assay.Cell migration and invasion abilities were evaluated by Transwell assays.Additionally,the expression level of CLDN18.2 was detected in human gastric cancer tissue microarrays using immunofluorescence.Results:MFC and AGS cell lines stably overexpressing CLDN18.2 protein were suc-cessfully established,with CLDN18.2 localized to the cell membrane as confirmed by immunofluorescence.Compared with empty vector controls,CLDN18.2 overexpression significantly enhanced proliferation(MFC:from day 4 onward,day 4:P<0.05,day 5:P<0.01;AGS:days 3～5,all P<0.001).The colony formation rates increased to 21.07%vs 13.33%for MFC and 47.53%vs 36.53%for AGS(both P<0.05).The number of migrated cells increased to 1.56-fold for MFC and 1.53-fold for AGS(both P<0.01),and the number of invaded cells increased by 20.01%for MFC and 18.81%for AGS(both P<0.05).Human gastric cancer tissue microarray analysis revealed significantly higher CLDN18.2 expression in primary gastric cancer lesions than in paired adjacent gastric mucosa(P<0.01),with a dichotomous expression pattern observed in metastatic foci.Conclusion:CLDN18.2 overexpression promotes proliferation,colony formation,migration,and invasion of gastric cancer cells in vitro.Tissue microarray analysis validated its aberrant expression in gastric cancer tissues and its heterogeneous expression in metastatic foci.These findings support the potential of CLDN18.2 as a therapeutic target for anti-tumor treatment.
刘小榕;谢华;朱亚杰;王悠;牟红梅;王绎;唐建宁;刘洋;寇玲娜;周进;魏阳
611137 成都,成都中医药大学 医学与生命科学学院610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科611137 成都,成都中医药大学 医学与生命科学学院611137 成都,成都中医药大学 医学与生命科学学院610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科610041 成都,四川省肿瘤医院·研究所,四川省肿瘤临床医学研究中心,四川省癌症防治中心,电子科技大学附属肿瘤医院 胸部肿瘤内科
医药卫生
Claudin-18.2胃癌细胞增殖细胞迁移细胞侵袭靶向治疗
Claudin-18.2Gastric cancerCell proliferationCell migrationCell invasionTargeted therapy
《肿瘤预防与治疗》 2026 (8)
615-624,10
This study was supported by grants from Sichuan Medical Science and Technology Innovation Research As-sociation(No.YCH-KY-YCZD2024-031). 四川省医学科技创新研究会"医创之巅"专项科研项目(编号:YCH-KY-YCZD2024-031)
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