基于COX-2/mPGES-1/PGE2信号通路探讨转化丸治疗大鼠腹膜纤维化的作用机制OA

目的 基于环氧合酶-2(COX-2)/微粒体前列腺素E合酶-1(mPGES-1)/前列腺素E2(PGE2)信号通路探索转化丸治疗大鼠腹膜纤维化(PF)的作用机制.方法 将65只SD雄性大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和转化丸低、中、高剂量组各13只.除对照组外,其余各组大鼠予腹腔注射4.25%腹膜透析液100 mL/(kg·d),连续注射8周建立PF模型.随机选取对照组和造模组大鼠摘取腹膜组织,肉眼观察模型组大鼠腹膜颜色较对照组明显浑浊,且病理结果显示腹膜发生增厚,间皮细胞出现损伤、破坏,最终每组各纳入12只大鼠.造模成功后,各给药组灌胃给药,低剂量组给予5.31 g/kg灌胃,中剂量组给予10.62 g/kg灌胃,高剂量组给予21.24 g/kg灌胃,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,1次/d,各组均连续干预4周后检测大鼠腹膜超滤量、葡萄糖转运量;取出腹膜组织,进行HE、Masson染色观察并测量腹膜厚度;RT-PCR和Western blot分别检测腹膜组织中COX-2、mPGES-1、前列腺素E2(PGE2)mRNA转录水平和蛋白相对表达量;用透射电镜观察分析腹膜组织超微结构的变化.结果 与对照组比较,模型组腹膜超滤量明显降低(P＜0.05),葡萄糖转运量、腹膜厚度及腹膜组织中COX-2、mPGES-1和PGE2的 mRNA转录水平和蛋白相对表达量均明显升高(P＜0.05),此外,模型组腹膜间皮细胞脱落、不连续,胶原纤维增生沉积,炎细胞大面积浸润.与模型组比较,低、中、高剂量组腹膜超滤量明显升高(P＜0.05),葡萄糖转运量、腹膜厚度及腹膜组织中COX-2、mPGES-1、PGE2 mRNA和蛋白相对表达量均明显降低(P＜0.05),低、中、高剂量组腹膜形态结构较模型组有明显改善.透射电镜结果显示:对照组腹膜间皮细胞形态规则,结构完整,相邻细胞间及细胞与基质间紧密连接;模型组腹膜间皮细胞表面不平整,腹膜间皮细胞可以看到空泡样变性,并且胶原纤维排列不规则,低、中、高剂量组上述情况较对照组均有所改善.结论 转化丸可改善腹膜纤维化大鼠的腹膜功能,其作用机制可能与抑制COX-2/mPGES-1/PGE2信号通路有关.