黄芪甲苷联合甘草酸对免疫抑制小鼠脾脏免疫功能研究OA

【目的】探讨黄芪甲苷联合甘草酸(astragalosideⅣcombined with glycyrrhizic acid,ASGA)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CY)诱导免疫抑制小鼠脾脏免疫功能的影响。【方法】将40只6周龄SPF级昆明系雄性小鼠适应性饲喂3 d后,随机分为5组,空白对照组(control)、模型组(model)、ASGA低、中、高剂量给药组(ASGA-L、ASGA-M、ASGA-H组剂量分别为15、30、60 mg/kg),每组8只。除空白对照组外,其余组小鼠采用腹腔注射80 mg/kg CY建立免疫抑制模型。造模3 d后,给药组小鼠灌胃相应浓度药物,1次/d,连续7 d。试验期间观察小鼠一般体征变化,末次给药后,采集血液,检测小鼠血细胞数量,分离血清测定其免疫球蛋白、细胞因子水平,利用实时荧光定量PCR检测血清ROR-γt和Foxp3基因相对表达量。颈椎脱臼处死小鼠后,分离脾脏组织,计算脾脏指数,通过苏木精-伊红(HE)染色观察脾脏组织病理学变化,通过CD3免疫组化染色观察T细胞的表达情况,用流式细胞术检测脾脏组织中CD4^(+)/CD8^(+)T细胞亚群。【结果】与空白对照组相比,模型组小鼠血液淋巴细胞数、血红蛋白含量和血清免疫球蛋白G(IgG)、IgM、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-10、IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及γ-干扰素(IFN-γ)含量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);模型组小鼠血清Foxp3基因相对表达量极显著升高(P<0.01),ROR-γt基因相对表达量极显著降低(P<0.01);模型组小鼠脾脏指数极显著上升(P<0.01),且小鼠脾脏红、白髓界限模糊,出现大量粒细胞;模型组小鼠脾脏的CD3蛋白水平极显著降低(P<0.01),CD4^(+)/CD8^(+)T细胞数量无显著变化(P>0.05)。与模型组相比,各给药组小鼠血液淋巴细胞数和血红蛋白含量均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);ASGA-H组小鼠血清IgG、IgM、IL-2、IL-4、IL-10、IL-17、TNF-α及IFN-γ含量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);各给药组小鼠血清Foxp3基因相对表达量均极显著降低(P<0.01),而ASGA-H组小鼠血清ROR-γt基因相对表达量极显著升高(P<0.01);ASGA-H和ASGA-L组小鼠脾脏指数均显著下降(P<0.05),且小鼠脾脏白髓与红髓界限恢复,炎性细胞浸润现象减轻;ASGA-H组小鼠脾脏的CD3蛋白水平极显著升高(P<0.01);各给药组小鼠CD4^(+)/CD8^(+)T细胞数量均极显著升高(P<0.01)。【结论】ASGA可有效改善CY诱导的小鼠免疫抑制状态,且剂量在60 mg/kg时效果最佳。