黄芩苷调控HMGB1/TLR4/NF-κB通路对肾病综合征大鼠肾损伤影响的研究OA

目的探讨黄芩苷调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路对肾病综合征(NS)大鼠肾损伤的影响。方法SD大鼠分为对照组、模型组、实验组、HMGB1抑制剂组和HMGB1激活剂组,每组12只。除对照组外,其他组大鼠均通过尾静脉注射阿霉素的方式构建NS模型,建模成功24 h后处理,实验组大鼠灌胃100 mg·kg^(-1)黄芩苷;HMGB1抑制剂组大鼠灌胃0.03 g·kg^(-1)HMGB1抑制剂甘草酸;HMGB1激活剂组大鼠灌胃100 mg·kg^(-1)黄芩苷且腹腔注射8μg·kg^(-1)HMGB1激活剂HMGB1重组蛋白(r HMGB1);模型组和对照组大鼠灌胃且腹腔注射10 mL·kg^(-1)生理盐水。每天处理1次,持续30 d。检测24 h尿蛋白、血清血肌酐、尿素氮水平、肾脏病理及肾脏白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;用TUNEL染色法检测肾脏组织中细胞凋亡率;用蛋白质印迹法检测肾脏半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、肿瘤蛋白p53(p53)、HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白相对表达水平。结果模型组大鼠肾脏组织中肾小球基底膜增厚,肾小球萎缩,有大量炎性细胞浸润。对照组、模型组、实验组、HMGB1抑制剂组和HMGB1激活剂组大鼠24 h尿蛋白分别为(65.56±4.73)、(212.19±12.26)、(87.76±5.15)、(95.53±6.11)和(138.87±8.25)mg·24 h^(-1);血清血肌酐分别为(51.57±3.18)、(128.86±7.25)、(63.69±4.12)、(70.75±4.06)和(95.73±5.29)μmol·L^(-1);血清尿素氮分别为(4.23±0.25)、(10.68±0.61)、(5.44±0.32)、(6.18±0.39)和(8.78±0.53)mmol·L^(-1);肾脏组织IL-1β水平分别为(37.65±2.18)、(83.39±5.07)、(44.55±2.56)、(50.52±2.89)和(69.89±4.17)pg·mL^(-1);肾脏组织MCP-1水平分别为(156.69±8.12)、(314.45±17.36)、(181.54±10.21)、(201.16±11.54)和(264.45±14.58)pg·mL^(-1);肾脏组织TNF-α水平分别为(34.99±2.15)、(90.81±5.63)、(43.78±2.52)、(51.19±3.15)和(67.11±3.89)pg·mL^(-1);肾脏组织细胞凋亡率分别为(4.67±0.31)%、(28.81±1.76)%、(7.08±0.39)%、(8.26±0.51)%和(18.22±1.03)%;肾脏组织Caspase-3蛋白相对表达水平分别为0.86±0.10、2.37±0.16、0.98±0.09、1.21±0.18和1.85±0.17;肾脏组织p53蛋白相对表达水平分别为0.15±0.02、0.68±0.07、0.24±0.03、0.36±0.04和0.51±0.05;肾脏组织HMGB1蛋白相对表达水平分别为0.65±0.08、2.04±0.17、0.87±0.09、0.95±0.08和1.34±0.13;肾脏组织TLR4蛋白相对表达水平分别为0.41±0.05、1.68±0.16、0.63±0.07、0.79±0.08和1.09±0.11;肾脏组织p-NF-κB p65蛋白相对表达水平分别为0.23±0.03、0.81±0.09、0.37±0.05、0.45±0.04和0.68±0.07,对照组的上述指标与模型组比较,模型组与实验组、HMGB1抑制剂组比较,实验组与HMGB1激活剂组比较,在统计学上差异有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩苷可能通过下调HMGB1/TLR4/NF-κB抑制NS大鼠炎症及细胞凋亡,减轻肾损伤。