益气化浊胶囊调节BA/TGR5/GLP-1通路改善2型糖尿病小鼠糖代谢OA

目的研究益气化浊胶囊对2型糖尿病小鼠(T2DM)的降糖效果与机制。方法40只C57BL/6J雌性小鼠随机选取6只作为对照组,其余34只用链脲佐菌素建立T2DM小鼠模型,造模成功30只,随机分为模型组、益气化浊低、中、高剂量组、阳性药物(吡格列酮)组,每组6只。干预4周,每周定期监测小鼠体重(BW)和空腹血糖(FBG),干预结束后检测口服糖耐量(OGTT),并采用胰岛素耐量实验(ITT)检测胰岛素敏感性。干预后采用16S rRNA高通量测序分析不同组小鼠肠道菌群多样性及丰度的变化;利用气相色谱-质谱(GC-MS)检测盲肠内容物中胆汁酸(BA)含量的变化;采用ELISA试剂盒检测小鼠血清胰岛素(INS)、肌酐(Cr)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、肽YY(PYY)及葡萄糖依赖性促胰岛素肽(GIP)的浓度。qPCR检测结肠组织中紧密连接蛋白(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)和闭合蛋白-1(Claudin-1)及炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10及TNF-α的表达。HE染色观察结肠组织的病理变化。Western Blot法检测结肠中G蛋白偶联受体5(TGR5)、GLP-1蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,模型组FBG、INS、HOMA-IR、T-CHO、TG、Cr、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平升高,血清GLP-1、PYY、GIP水平及结肠组织ZO-1、Occludin和Claudin-1表达下降(P<0.01),TGR-5、GLP-1蛋白表达水平降低(P<0.01)。与模型组比较,益气化浊胶囊降低FBG、INS、T-CHO、TG和Cr含量,增加肠道激素GLP-1、PYY和GIP的含量以及ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达,降低了促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达、增加抗炎因子IL-10的表达,减弱肠道组织损伤,增加TGR5和GLP-1蛋白表达(P<0.05)。在门水平上益气化浊低剂量组厚壁菌门丰度降低,拟杆菌门丰度升高;在属水平上益气化浊低剂量组Allobaculum属和乳酸菌属丰度降低;增加胆酸(CA)、鹅去氧胆酸(CDCA)和熊去氧胆酸(UDCA)的含量(P<0.05,P<0.01)。结论益气化浊胶囊可通过改变肠道菌群,调控胆汁酸的分泌,影响TGR5和GLP-1合成,从而更好地调节糖代谢。