补阳还五汤联合BMSCs-Exos抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻BV2细胞炎症活化OA

目的基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路研究补阳还五汤(BYHWD)联合骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exos)对小胶质细胞的活化及炎症反应的影响。方法脂多糖(LPS)诱导BV2细胞构建炎症模型,未经处理的细胞设置为空白组,其余处理的细胞分为模型组、PBS组、BYHWD组(20%BYHWD含药血清)、BMSCs-Exos组(100 ng/mL BMSCs-Exos)及BYHWD+BMSCs-Exos组(20%BYHWD含药血清+100 ng/mL BMSCs-Exos)。激光扫描共聚焦显微镜观察细胞对BMSCs-Exos内化情况;CCK-8实验检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫荧光检测细胞炎性活化情况;ELISA检测炎症因子表达;qRT-PCR和Western Blot检测NF-κB p65、MyD88和TLR4相关因子mRNA及蛋白表达。结果与模型组比较,BMSCs-Exos组及BYHWD组能够明显抑制BV2细胞向炎症状态活化,促进其增殖,抑制其凋亡,降低白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达,降低TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白和mRNA的表达水平(P<0.05,P<0.01);BYHWD+BMSCs-Exos组效果优于BMSCs-Exos组及BYHWD组(P<0.05,P<0.01)。结论BMSCs-Exos联合BYHWD可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活,减轻小胶质细胞向炎性活化,具有干预脊髓损伤的潜力。