山奈酚调控Wnt/β-catenin通路对脂多糖诱导人牙髓干细胞炎症损伤及成骨分化的影响OA

目的:探讨山奈酚调控Wnt/β-catenin通路对脂多糖(LPS)诱导人牙髓干细胞(hDPSCs)炎症损伤及成骨分化的影响。方法:建立LPS诱导的细胞模型,用不同浓度山奈酚溶液处理hDPSCs后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,筛选出山奈酚的合适处理浓度。将hDPSCs分为对照组,LPS组,山奈酚低(山奈酚-L组)、中(山奈酚-M组)、高浓度组(山奈酚-H组),山奈酚高浓度+Wnt抑制剂组(山奈酚-H+DKK1组)。ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL)-6(IL-6)、IL-1β水平;碱性磷酸酶(ALP)染色法检测细胞ALP活性;茜素红染色观察细胞矿化结节的形成情况;免疫印迹检测Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、骨形成蛋白2(BMP2)和Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,LPS组ALP活性、矿物结节数量、RUNX2、OCN、BMP2、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著下降,而TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著升高;与LPS组相比,山奈酚-L组、山奈酚-M组、山奈酚-H组ALP活性、矿物结节数量、RUNX2、OCN、BMP2、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著升高,而TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著降低;与KAE-H组相比,山奈酚-H+DKK1组ALP活性、矿物结节数量、RUNX2、OCN、BMP2、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平显著下降,而TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著升高。结论:山奈酚可减轻LPS诱导hDPSCs的炎症损伤作用,并且可抑制成骨分化,可能是通过激活Wnt/β-catenin通路实现。