基于斑马鱼模型的四株益生菌益生特性的研究OA

益生菌作为传统抗生素的绿色替代方案可有效防控水产养殖中细菌性病害,但其单菌株应用存在显著功能局限,亟待通过菌株筛选、组合优化实现突破。为开发高效水产绿色益生菌制剂,系统评估了实验室前期筛选的四株益生菌(芽孢杆菌BAC1、BAC2,酵母菌SAC,乳杆菌LAC)的体外益生特性,并利用斑马鱼模型比较单菌及复合菌剂(MIX,体积比1:1:1:1)的体内效果。体外实验显示BAC1、BAC2产蛋白酶、淀粉酶及纤维素酶,BAC2与LAC拮抗嗜水气单胞菌等病原菌,所有菌株耐酸耐胆盐、具有肠道黏附潜力且无溶血性。体内实验表明四株菌可在斑马鱼肠道定植6—9 d;各益生菌组均显著促进斑马鱼生长(30 d体重平均提升约30%);攻毒实验证实益生菌处理显著提高了斑马鱼抵抗嗜水气单胞菌感染的能力,其中复合菌剂(MIX)组存活率最高(67%)。qPCR结果显示,益生菌可显著上调斑马鱼免疫(IL-10、Lysozyme)、抗氧化(SOD1、CAT)及生长代谢(IGF-1)相关基因表达,抑制促炎因子(TNF-α、IL-1β)的表达。肠道菌群16S rRNA基因扩增子测序结果表明,益生菌干预显著改变了菌群结构,降低了变形菌门丰度,提高了厚壁菌门比例,且复合菌剂(MIX)对潜在致病菌(气单胞菌属)的抑制及有益菌的协同富集效果最为显著。综上,四株益生菌可通过多维机制促宿主健康,复合菌剂(MIX)协同增效显著,为水产复合益生菌制剂开发提供了潜力菌株组合与理论依据。