短须裂腹鱼Cu/Zn-SOD、GPX和HSC70基因的克隆及对短期饥饿胁迫的响应OA

揭示短须裂腹鱼(Schizothorax wangchiachii)铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和组成型热应激蛋白70(HSC70)基因的结构特征及对饥饿胁迫的响应,为鱼类应激胁迫相关研究提供基础资料。将300尾短须裂腹鱼幼鱼随机分成3组进行持续7 d的饥饿胁迫试验,在第1天、第4天和第7天分别取鱼体肝脏、脾脏、鳃和肾脏组织,通过同源克隆和PCR快速扩增的方法获得各组织中的Cu/Zn-SOD、GPX、HSC70基因的cDNA序列,研究3种基因在不同组织中的表达,并探究其同源性和系统进化。结果表明:短须裂腹鱼Cu/Zn-SOD基因全长cDNA为801 bp,开放阅读框(ORF)为465 bp,翻译的氨基酸序列含有2个铜锌超氧化物歧化酶家族的标签序列;GPX基因全长cDNA 925 bp,ORF长度576 bp,包括GPX基因家族标签序列、Se结合活性位点和PGNG结构域;HSC70基因的cDNA核心序列全长2 348 bp,ORF长度1 950 bp,含有3个保守的家族标签基序。系统进化树的结果显示,短须裂腹鱼Cu/Zn-SOD基因的氨基酸序列与犀角金线鲃(Sinocyclocheilus rhinocerous)具有很高的相似性,达到95%;GPX基因的氨基酸序列与似野结鱼(Tor tambroides)的相似性最高,为97.38%;HSC70基因的氨基酸序列与齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)同源性最高,为99.38%。荧光定量PCR检测结果表明Cu/Zn-SOD和GPX基因在肝脏中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。短期饥饿影响GPX基因在肝和肾中的表达;GPX基因比Cu/Zn-SOD基因和HSC70基因更为敏感,可以作为短期饥饿胁迫的检验指标,为短须裂腹鱼的健康养殖提供理论依据。