电针“合谷”“曲池”调控PAR2/TRPV3通路对特应性皮炎小鼠细胞Parthanatos的影响OA

目的:基于蛋白酶激活受体2(PAR2)/瞬时感受器电位香草酸受体3(TRPV3)通路,观察电针“合谷”“曲池”对特应性皮炎(AD)小鼠皮肤炎性损伤、瘙痒及皮肤多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)依赖性细胞死亡(Parthanatos)的影响,探讨电针治疗AD的可能机制。方法:将36只BALB/c雄性小鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组12只。采用卡泊三醇(MC903)溶液涂抹法复制AD模型。造模成功后,电针组电针双侧“合谷”“曲池”(每日1次,30 min/次,连续7 d)。干预前后对各组小鼠进行特应性皮炎严重程度评分指数(SCORAD)评分及搔抓次数记录;HE染色观察皮肤组织病理形态;TUNEL染色检测皮肤组织细胞凋亡情况;Western blot法检测小鼠皮肤组织PAR2、TRPV3、白细胞介素(IL)-33、IL-31、IL-13、PARP1、线粒体凋亡诱导因子1(AIFM1)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测小鼠皮肤组织PAR2、TRPV3、炎性因子(IL-33、IL-31和IL-13)、细胞Parthanatos相关因子(PARP1、AIFM1和MIF)mRNA表达水平,免疫荧光法检测皮肤组织PARP1表达。结果:与正常组相比,模型组小鼠SCORAD评分升高(P<0.01),搔抓次数增多(P<0.01),皮肤组织细胞凋亡率升高(P<0.01),皮肤组织中PAR2、TRPV3、炎性相关因子(IL-33、IL-31和IL-13)、Parthanatos相关因子(PARP1、AIFM1和MIF)蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01,P<0.05),PARP1荧光强度升高(P<0.01)。与模型组相比,电针组小鼠SCORAD皮损评分降低(P<0.01),搔抓次数减少(P<0.01),皮肤组织细胞凋亡率降低(P<0.01),皮肤组织中PAR2、TRPV3、炎性相关因子(IL-33、IL-31和IL-13)、Parthanatos相关因子(PARP1、AIFM1和MIF)蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01),PARP1荧光强度下降(P<0.01)。HE染色结果显示,模型组小鼠皮损严重,表皮增生明显并伴大量炎性细胞浸润;电针组小鼠皮肤表皮结构相对完整,结构损伤明显减轻,炎性细胞浸润较少。结论:电针“合谷”“曲池”可以改善AD小鼠皮肤炎性损伤及瘙痒,其机制可能与下调PAR2/TRPV3通路,抑制皮肤细胞Parthanatos相关。