基于Th17/Treg细胞稳态探讨电针通过JAK1/STAT3信号通路改善心肌缺血大鼠炎性损伤的机制OA

目的:观察电针对心肌缺血(MI)大鼠心肌组织辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞稳态及炎性相关Janus激酶1(JAK1)/信号转导及转录激活因子(STAT)3信号通路关键蛋白表达的影响,探讨电针改善MI后炎性损伤的机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组6只。模型组、电针组连续7 d皮下多点位注射盐酸异丙肾上腺素(5 mg∙kg^(-1)∙d^(-1))制备MI大鼠模型。电针组电针“内关”“足三里”,20 min/次,1次/d,共21 d。心电图记录大鼠ST段高度和T波振幅;HE染色观察心肌组织病理变化;Masson染色观察心肌细胞胶原沉积情况;ELISA法检测大鼠血清和心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)的含量;流式细胞术测定大鼠心肌组织中Th17细胞和Treg细胞比例;Western blot法检测心肌组织JAK1、STAT3、磷酸化(p)-STAT3、维甲酸相关孤儿受体α(RORα)、叉头样转录因子3(Foxp3)、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠ST段高度、T波振幅升高(P<0.01);心肌组织炎性损伤明显,大量心肌细胞溶解坏死,纤维组织增生;Masson染色可见心肌胶原纤维数量增加,胶原容积分数(CVF)升高(P<0.01);心肌组织和血清中TNF-α、IL-17含量升高(P<0.01),IL-10含量降低(P<0.01);心肌组织Treg细胞比例降低(P<0.01),Th17/Treg比值升高(P<0.01);心肌组织中JAK1、STAT3、p-STAT3、RORα蛋白表达水平升高(P<0.01,P<0.05),Foxp3、SOCS3蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠ST段高度、T波振幅降低(P<0.05);心肌组织炎性损伤缓解,胶原纤维数量明显减少,CVF降低(P<0.01);心肌组织和血清中TNF-α、IL-17含量降低(P<0.05,P<0.01),IL-10含量升高(P<0.01);心肌组织Th17细胞比例显著降低(P<0.01),Treg细胞比例升高(P<0.01),Th17/Treg比值降低(P<0.01);心肌组织JAK1、STAT3、p-STAT3、RORα蛋白表达水平下降(P<0.01,P<0.05),Foxp3、SOCS3蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论:电针“内关”“足三里”可改善MI大鼠心肌炎性损伤,其机制可能与电针通过JAK1/STAT3信号通路良性调控MI大鼠心肌组织Th17/Treg细胞稳态,以平衡促炎因子TNF-α、IL-17及抗炎因子IL-10的分泌,减轻炎性损伤有关。