转化生长因子-β1对小尾寒羊卵巢颗粒细胞中circRNA表达的影响OA

【目的】本研究使用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理小尾寒羊卵巢颗粒细胞,筛选与增殖和凋亡相关的环状RNA(circRNAs),并对其靶向调控的miRNAs及下游靶基因进行预测,构建内源性竞争RNA(ceRNA)调控网络,为深入阐明小尾寒羊卵巢颗粒细胞增殖凋亡的分子调控机制提供参考。【方法】在体外培养的小尾寒羊卵巢颗粒细胞中添加10 ng/mL TGF-β1处理后进行转录组测序,筛选差异表达circRNAs(DECs),并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析;随机挑选5个DECs通过实时荧光定量PCR进行验证;通过Cytoscape3.7.1软件构建ceRNA调控网络图。【结果】转录组测序共鉴定到20564个circRNA,与对照组相比,TGF-β1处理组卵巢颗粒细胞中共筛选出191个DECs(其中117个上调、74个下调)。随机选取5个DECs进行实时荧光定量PCR验证,试验结果与测序结果一致,验证了测序结果的可靠性。GO功能和KEGG通路富集分析显示,DECs主要参与细胞外基质、转化生长因子-β激活调控、细胞黏附分子结合、细胞骨架组织及泛素依赖的蛋白质分解代谢等过程,涉及PI3K-Akt、AMPK、TGF-β、Wnt和Hippo等信号通路。构建的circRNA-miRNA-mRNA调控网络显示,novel_circ_011820-novel-m0455-5p-FAS、novel_circ_011820-miR-11986-z-TIMP3等通路可能通过ceRNA机制参与卵巢颗粒细胞增殖和凋亡调控。【结论】本研究通过生物信息学筛选获得了可参与调控小尾寒羊卵巢颗粒细胞的增殖与凋亡过程的关键DECs,试验结果为深入解析小尾寒羊卵巢颗粒细胞生长发育的分子遗传机制提供了理论参考。