特发性肺纤维化急性加重气陷络阻证患者血清外泌体微小核糖核酸的差异表达OA

目的:观察特发性肺纤维化急性加重(acute exacerbation of idiopathic pulmonary fibrosis,AE-IPF)气陷络阻证患者血清外泌体中微小核糖核酸(microRNA,miRNA)的差异表达。方法:收集72例AE-IPF患者(气陷络阻证36例、非气陷络阻证36例)外周血,分离外泌体。采用透射电镜及纳米颗粒跟踪分析仪检测外泌体形状、粒径。用高通量测序方法检测气陷络阻证、非气陷络阻证AE-IPF患者血清外泌体中miRNA,分析其差异表达,确定目标miRNA。用实时荧光定量逆转录–聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测方法对差异表达的miRNA进行验证。结果:从AE-IPF患者(气陷络阻证36例、非气陷络阻证36例)外周血中分离出的外泌体形状、粒径均符合要求,对miRNA的测序及qRT-PCR验证结果显示,与AE-IPF非气陷络阻证患者比较,AE-IPF气陷络阻证患者miR-122-5p、miR-192-5p、miR-125b-1-5p、miR-125b-2-5p、miR-1246、miR-1290、miR-30a-5p、miR-483-5p等8个miRNA明显升高;miR-376c-3p、miR-342-5p、miR-431-5p等3个miRNA明显下降。受试者工作特征曲线下面积(area under the receiver operating characteristic curve,AUC)分析提示miR-1246、miR-122-5p、miR-483-5p、miR-30a-5p的AUC分别为1.000、0.944、0.889、0.833,表明miR-1246、miR-122-5p、miR-483-5p、miR-30a-5p高表达与AE-IPF气陷络阻证之间具有一定的关联性。结论:AE-IPF气陷络阻证与非气陷络阻证患者血清外泌体中存在差异表达的miRNA,其中miR-1246、miR-122-5p、miR-483-5p、miR-30a-5p在AE-IPF气陷络阻证患者血清外泌体中呈高表达。