基于CB2/NOX4/NLRP3途径肾必宁颗粒对IgA肾病大鼠作用机制OA

目于激活内源性大麻素受体2(cannabinoid receptor 2,CB2),抑制NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)通路探讨肾必宁颗粒对IgA肾病(immunoglobulin A ne-phropathy,IgAN)大鼠的影响。方法SPF级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,从57只随机抽取9只为空白组,造模组48只,采用“牛血清白蛋白(BSA)+CCl_(4)+脂多糖(LPS)”联合造模法制备IgAN的动物模型,将成功造模的大鼠随机分为模型组(12只),泼尼松组(12只,醋酸泼尼松6.25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),肾必宁等剂量组(12只,肾必宁颗粒4.1 g·kg^(-1)·d^(-1)),肾必宁高剂量组(12只,20.5 g·kg^(-1)·d^(-1)),模型组与空白组予等量0.9%氯化钠溶液,灌胃持续4周。大鼠处死前留取尿液､血液､肾脏及结肠。采用酶标法检测尿红细胞定量(urine red blood cell,URBC)､24小时尿总蛋白(24-hour urine total protein,24 h UTP)及肝肾功能;HE染色观察肾组织与结肠组织病理变化;Western Blot检测肾､结肠CB2､NOX4､NL-RP3蛋白水平;免疫荧光法观察肾脏组织IgA沉积。结型组大鼠白蛋白(albumin,ALB)降低明显,丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)､血肌酐(serum creatine,SCr)､血尿素氮(blood usea nitrogen,BUN)､24 h UTP､URBC水平明显升高,结肠及肾脏CB2､NOX4､NLRP3蛋白水平明显升高,与空白组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);肾必宁治疗两组大鼠ALB升高,ALT､SCr､BUN､24 h UTP､URBC水平降低,结肠组织及肾组织CB2蛋白上调,NOX4､NLRP3蛋白下调,对比模型组,具有显著差异(P<0.05)。HE染色显示:模型组结肠组织炎症明显,肾脏损伤较重。与模型组比较,肾必宁等剂量､高剂量治疗组大鼠结肠炎症减轻,肾脏病理改善。免疫荧光观察模型组系膜区IgA沉积较强,与模型组对比,肾必宁等剂量､高剂量治疗组系膜区IgA沉积减少。结必宁可通过改善IgAN大鼠结肠炎症､升高CB2表达,抑制NOX4/NLRP3,减少IgA肾脏沉积,进而改善上述生化指标､减轻肾脏病理损伤。