TMEM175通过PINK1/Parkin介导的线粒体自噬调节小鼠血管平滑肌细胞增殖与迁移OA

目的研究跨膜蛋白175(transmembrane protein 175,TMEM175)在小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖与迁移中的作用和可能机制。方法小鼠VSMCs增殖与迁移模型用血小板源性生长因子BB诱导建立,小鼠VSMCs通过慢病毒转染过表达TMEM175;细胞的增殖能力用CCK-8及增殖细胞核抗原(Ki-67)免疫荧光检测,细胞的迁移能力用划痕实验检测,Western blot检测TMEM175及线粒体自噬相关蛋白表达水平。使用PINK1 siRNA转染小鼠VSMCs沉默PINK1表达,再次检测上述相关指标。同时为探究TMEM175在血管再狭窄后血管内膜增生中的作用,本研究将C57小鼠随机分为Sham组、Sham+over-TMEM175组、Injured组、Injured+over-TMEM175组及Injured+knock-down-TMEM175组。小鼠颈动脉内膜的增生程度用HE染色观察,颈动脉内膜血管平滑肌的增殖程度用Ki-67免疫荧光染色观察。结果过表达TMEM175明显减弱小鼠VSMCs的增殖与迁移能力;经PDGF-BB处理后,过表达TMEM175使细胞内线粒体自噬相关蛋白表达增加,溶酶体催化活性增强,线粒体自噬增强,降低ROS水平;沉默PINK1后,过表达TMEM175对VSMCs增殖及迁移能力的抑制作用明显削弱。同时,过表达TMEM175能改善小鼠颈动脉损伤后内膜的增生。结论过表达TMEM175通过PINK1/Parkin线粒体自噬通路增加受损线粒体的清除,抑制小鼠VSMCs的增殖与迁移。