高糖刺激对胚胎干细胞诱导分化类β细胞的影响OA

目的探讨不同浓度高糖刺激对小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)ES-D_(3)定向诱导分化为类β细胞过程的影响。方法使用不同浓度葡萄糖作用于ES-D_(3)细胞,通过模拟胰腺发育过程,进行类β细胞的定向诱导分化,镜下观察细胞形态学变化,双硫腙染色鉴定类β细胞的成熟;在诱导分化的不同阶段,蛋白免疫印迹法检测性别决定区Y盒转录因子17(SRY-box transcription factor 17,Sox17)、胰腺十二指肠同源框因子1(pancreatic duodenal homeobox-1,Pdx1)、神经元素3(neurogenin 3,Ngn3)、NK6同源盒1(NK6 homeobox 1,Nkx6.1)和肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A(vmaf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A,Mafa)的蛋白表达;酶联免疫吸附法、免疫荧光检测细胞表达胰岛素及C肽的情况;电镜观察类β细胞的超微结构。结果与空白组相比,各高糖组分化阶段中的关键转录因子Sox17、Pdx1、Ngn3、Nkx6.1和Mafa表达均降低(P<0.05);各高糖组葡萄糖刺激下胰岛素和C肽分泌量均降低(P<0.01)。电镜下可见高糖模型组出现不同程度的线粒体肿胀和内质网扩张。结论高糖刺激会抑制ESCs向类β细胞的分化进程,其作用机制可能与下调胰岛β细胞分化各阶段Pdx1路径关键转录因子的表达有关。