吲哚-3-丙酸预处理通过激活Nrf2信号通路减轻对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤OA

目的:探讨吲哚-3-丙酸(IPA)预处理对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的小鼠急性肝损伤的干预作用及其潜在机制。方法:将32只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分成4组:对照(CON)组、IPA组、APAP组和APAP+IPA组,每组8只。IPA组和APAP+IPA组小鼠连续7 d灌胃20 mg/kg IPA溶液后,给予APAP组和APAP+IPA组小鼠单次腹腔注射400 mg/kg APAP构建小鼠急性肝损伤模型。在APAP给药后24 h处死小鼠,HE染色评估肝损伤情况;试剂盒测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平;ELISA和RT-qPCR法检测血清和肝组织炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平;TUNEL法检测小鼠肝组织DNA断裂/细胞死亡情况;试剂盒测定肝组织氧化应激相关指标丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶活性(T-SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)水平;RT-qPCR法检测肝组织氧化应激/抗氧化相关因子超氧化物歧化酶2(SOD2)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)、谷胱甘肽S-转移酶α1(GSTa1)和NADPH氧化酶2(NOX2)的mRNA水平;RT-qPCR和Western blot检测肝组织核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路相关蛋白Nrf2、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素加氧酶1(HO-1)的mRNA和蛋白表达水平。结果:IPA预处理显著减轻APAP诱导的小鼠肝组织病理学损伤,降低血清ALT、AST、LDH和GGT水平(P<0.05)。此外,IPA有效抑制APAP引起的血清和肝组织中促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的升高(P<0.05),有效减少肝组织TUNEL阳性细胞数量(P<0.05)。IPA还显著缓解APAP诱导的肝脏氧化应激,表现为降低MDA含量,恢复GSH、T-SOD和T-AOC水平(P<0.05),并调控抗氧化因子SOD2、GPX1和GSTa1及促氧化因子NOX2的mRNA表达(P<0.05)。进一步结果显示,IPA可促进Nrf2的核转位,并上调其下游靶蛋白HO-1和NQO1的表达(P<0.05),提示其作用可能与Nrf2信号通路激活有关。结论:IPA预处理可减轻APAP诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与增强肝脏抗氧化防御能力、减轻氧化应激和炎症反应以及促进Nrf2信号通路激活有关。