解毒祛瘀滋阴方通过Wnt信号通路调控MRL/lpr狼疮小鼠骨髓间充质细胞衰老OA

[目的]探讨解毒祛瘀滋阴方调控骨髓间充质细胞(bone marrow mesenchymal cells,BM-MSCs)衰老治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的作用机制。[方法]将10只C57BL/6J雌性小鼠作为正常对照组,30只MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、西药组、中药组。正常对照组和模型组灌胃蒸馏水,中药组予解毒祛瘀滋阴方浓缩液(15.6 g·kg^(-1))灌胃,西药组予醋酸泼尼松混悬液(5 mg·kg^(-1))灌胃。连续给药10周后,检测小鼠血清抗双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)抗体、ESR、CRP水平。剥取小鼠股骨和胫骨,培养出高纯度P3代BM-MSCs,观察BM-MSCs生长情况及形态变化,检测P3代BM-MSCs表面抗原标记,检测BM-MSCs中衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-GAL)水平,细胞衰老相关细胞因子Wnt3a、β-catenin的mRNA表达,细胞差异基因蛋白p53和p21表达。[结果]与正常对照组比较,模型组抗ds-DNA、ESR及CRP水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,西药组及中药组明显下降(P<0.01),中药组和西药组差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠BM-MSCs呈现体积增大,形状不规则扁平,细胞边界不清晰,立体感消失等衰老特征;与模型组比较,西药组、中药组细胞衰老程度减弱。与正常对照组比较,模型组BM-MSCs中SA-β-GAL水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,西药组、中药组SA-β-GAL水平均下降(P<0.01,P<0.05)。与正常对照组比较,模型组衰老相关的Wnt3a、β-catenin的mRNA以及p21、p53蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,西药组和中药组Wnt3a、β-catenin的mRNA以及p21、p53蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05)。[结论]解毒祛瘀滋阴方能抑制Wnt信号通路的异常激活,调控BM-MSCs衰老,从而缓解SLE病情。