艾灸“内关”“阳陵泉”对创伤后应激障碍小鼠海马小胶质细胞活化的影响OA

目的观察艾灸“内关”和“阳陵泉”穴对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)小鼠行为变化以及海马小胶质细胞活化的影响,探讨艾灸改善PTSD的作用机制。方法40只C57BL/6小鼠随机抽取12只作为正常组,其余小鼠采用改良的单一延长应激方法制备PTSD模型。将24只模型制备成功的小鼠随机分为模型组与艾灸组,每组12只。艾灸组给予艾灸“内关”和“阳陵泉”穴治疗。模型组接受相同时间及方式的抓取和固定,但不给予艾灸治疗。采用旷场实验、高架十字迷宫行为学实验检测小鼠行为学变化;苏木精—伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色法观察海马组织的形态学改变;免疫荧光法检测小鼠海马组织离子化钙结合适配分子1(ionized calcium-binding adapter molecule 1,Iba-1)的荧光强度及小胶质细胞形态学变化;ELISA法测定海马组织中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6水平;采用RT-qPCR和Western blot法分别检测小鼠海马组织中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体原肌球蛋白受体激酶B(tropomyosin receptor kinase B,TrkB)蛋白和mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠进入中央区域次数、中央区域运动路程和中央区域停留时间及进入开臂次数、开臂活动时间百分比均显著减少(P<0.05);海马神经元损伤;海马组织中Iba-1平均荧光强度显著增加(P<0.05),小胶质细胞胞体显著增大(P<0.05),最大分支长度显著缩短(P<0.05),分支数以及分支末梢数显著减少(P<0.05);海马组织中IL-1β、IL-6水平均显著升高(P<0.05);海马BDNF、TrkB蛋白及mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组小鼠进入中央区域次数、中央区域运动路程、中央区域停留时间及进入开臂次数、开臂活动时间百分比均显著增加(P<0.05);海马神经元损伤改善;海马组织中Iba-1平均荧光强度显著降低(P<0.05),小胶质细胞胞体显著缩小(P<0.05),最大分支长度显著增加(P<0.05),分支数以及分支末梢数显著增加(P<0.05);海马组织中IL-1β、IL-6水平均显著降低(P<0.05);海马组织中BDNF、TrkB蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.05)。结论艾灸“内关”和“阳陵泉”穴能够改善PTSD小鼠焦虑抑郁样行为,其机制可能与抑制海马小胶质细胞过度活化、减轻神经炎症、促进BDNF/TrkB信号通路相关蛋白表达,从而改善海马神经元损伤有关。